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第一单元第二章 第三节 细胞融合技术 知识系统化 （一）细胞融合技术： 1．细胞融合：两个或两个以上的_________或_________细胞融合成一个细胞的过程。也称为 。 2．细胞融合技术：用_________诱导细胞融合，并在一定条件下使融合的细胞_________形成新物种或新品种的过程。 3．细胞融合的诱导方法：_________诱导、_________诱导、电融合技术。 4.结果：产生具有原来两个细胞 的细胞，称为 。 5、比较几种诱导方式的优缺点： 病毒诱导 聚乙二醇诱导 电场诱导 优点 缺点 （二）细胞融合与单克隆抗体：（动物细胞工程） 1．单克隆抗体的概念：源自_________的克隆所产生的抗体，只会特异性地作用于一种_________，这种抗体称为单克隆抗体。 2．单克隆抗体的制备 (1)过程： 第一步：将　　　　注射到小鼠体内进行免疫； 第二步：从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的　　　　　　　细胞，与小鼠的　　　　　　　细胞用　　　　　　　或聚乙二醇的诱导下融合；思考?此时，培养液中会有哪几种细胞？? 第三步：在特定的　　　　　培养基中，筛选出　　　　　细胞； 原因：在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有　????? 才能生长 第四步：培养杂交瘤细胞，从中挑选出　　　　　　　　　　　　　　　　的细胞群，继续培养； 第五步：将该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠　　　　内增殖，然后再分离纯化单克隆抗体； 提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。? 植物细胞杂交() 动物细胞融合(单克隆抗体制备) 过?? 程 第1步 原生质体的制备(酶解法) 正常小鼠的处理(注射灭活抗原) 第2步 原生质体的融合(物化法) 动物细胞融合(物化生法) 第3步 杂种细胞的筛选和培养 杂交瘤细胞的筛选和培养 第4步 杂种植株鉴定 提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高) 原理/理论基础 、植物细胞的全能性 细胞膜的流动性、 融合前处理 酶解法除去细胞壁：酶、酶 注射特定抗原法免疫处理正常小鼠 促融因子 物理法：电刺激、离心、振动 化学法：聚乙二醇 物化法：与植物相同 生物法： 意义和用途 (1)克服有性障碍(2)培育作物新品种 有助于疾病的诊断、治疗、预防 ◆ 利用 无限增殖的特性。 ◆ 利用 技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。 ◆ 利用 技术大量培养杂交瘤细胞。 2、为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合？不灭活的病毒能作为诱导剂吗？ 3、B淋巴细胞有什么特点？若要想获得大量的单一抗体，如何做呢？ 4、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的，那么，怎样解决这一问题的呢？ 5、选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么？ 6、对比植物体细胞杂交和动物细胞融合的有关知识： 比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 细胞全能性 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电刺激、振动、聚乙二醇（PEG）诱导 克服远源杂交不亲和，获得杂种植株 动物细胞融合 细胞膜的流动性 用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合 除应用植物细胞杂交手段外，还有用灭活病毒诱导 制备单克隆抗体 三、课堂检测 1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是 ( ) A、融合的原理 B、融合的优点 C、融合的诱导手段 D、融合的过程 2、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过程注射的物质和A细胞的名称为 ( ) A、抗体、T淋巴细胞 B、抗原、T淋巴细胞 C、抗体、B淋巴细胞 D、抗原、效应B淋巴细胞 3、单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于( ) A、单克隆抗体能够制成“生物导弹” B、单克隆抗体能够在体外制备 C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、免疫活性高 D、单克隆抗体制备过程简单 4、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是( ) A．特异性强、灵敏度高 B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌 5、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因