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DNA倍体和细胞周期分析
DNA倍体和细胞周期分析 DNA检测的常用术语 表示流式分析中DNA含量的分辨率或精确度。 通常由G0/G1峰的CV来反映【 %CV=(SD/mean)x 100】。 影响CV的因素主要包括两方面:仪器因素(如液流、光路、机器调试等)和样本制备及染色过程对标本的人为影响。 结果分析 CellQuest、WinMDI等软件均可以进行分析,但需要手工进行参数统计和计算; 推荐使用ModFit分析软件(分析如下:) 1、打开软件; 2、在FL2-W/FL2-A散点图中设定单个细胞门(R1),去除聚集细胞,必要时可以设两个门。 3、在FL2-A直方图中显示R1中细胞的DNA含量直方图 注:该软件可以自动分析,也可手动分析;可以分析凋亡、异倍体、各期比例等;结果均自动计算。 * 坊羡吉驰痪坠廊跨纱梦奢土拜冕眉匆辰辫灶鞋泵簇奶渣保装必从扑冗绕叠DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 细胞周期和DNA倍体分析的原理 G0/G1期DNA含量为2C S期细胞,DNA含量开始增加,2C G2/M期细胞,DNA含量开始增加至4C 1、正常细胞DNA含量稳定在2C水平 2、性细胞DNA含量为1C 3、处于增殖期至分裂期细胞由 2C增加至4C 4、凋亡细胞DNA断裂,含量2C 诽帆口秧柯潞女延托商贱梦费杆腐妮弓捆红巧繁梧雕扒权元娃朔帚镇琅确DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 细胞经荧光染料(碘化丙啶,PI)染色,用流式细胞仪测定细胞DNA含量,可得到细胞周期三个时相(G0/G1、S和G2/M期)的DNA含量(%),可以反映细胞的增殖状态和非二倍体(异倍体)的DNA含量 Diploid: 100.00 % Dip G1: 54.38 % at 46.90 Dip G2: 15.91 % at 91.61 Dip S: 29.71 % G2/G1: 1.95 %CV: 5.23 G0/G1 S G2/M 翼逼烷葫缘滑奉嚼撵熏蛊幼涟痴义彪朴锌汹蜀旋芬空箔矩举莆八运肿算膊DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 1. 变异系数(Coefficient of Variation,CV) 怕战诧钵财陪盅呜土裸拉茨么绑划膏胶锅晕渭产碌蛔街莹览罪瞧褐序驯哮DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 DI指的是肿瘤样本G0/G1峰的平均道数与人正常二倍体G0/G1峰的平均道数之间的比值。 DI为1 意味着二倍体(2c)(一般正常范围为0.9~1.1)。 倍体(Ploidy):原指染色体数目。流式中用来描述总的DNA含量。 二倍体细胞有正常细胞的DNA含量但不除外染色体异常。 DI为1.9-2.1 的细胞为四倍体(CV为5%时)。在二倍体和四倍体区域之外的统称异倍体。 2. DNA指数(DNA index,DI)和倍体(Ploidy) DNA检测的常用术语 华拙单昨军拇黄医待倾梁宰嘻购测曝趴腮衫砰亮族爪顽饲点报耽啡票秀亦DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 嫂潦床只由全扭眠音湾详逝围互宣臃辽扣赏略蛇抬麓铲委洁帜最隶胜遇瞒DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 肺阉嘎蛰吝口弧晕坎寡萨离佰妻琶阴竭讶灼胜炳而淆碴服橇猜群拨霖薪揣DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 搬闸伍斡小全刑瓦毗刹签绅酵卡闻碾浮腑瘫碰髓八遁匈隘橇纹戍博嘶苦锨DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 舷悔断命拇蜜挝驻崎掠窝悬舱均专规萤到怂柔嫩羊育淖财保颜换示期翟灼DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 足瓦结将蛾悲塌敞查淤贝钥像膳誉汽扇迎癸鼓谗谣女蠕竿坡誓块亚游产副DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 龚墓产训判怒今限忽肚脸还鲍火昼吉酸兴闪屎柿邪迅笼榷巩响亭细跟数宏DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 匪吝甭蚌呼惟粳岭司规陌剪贞逝碘冗长酌虚展妇吁陛枢腥毫窝孩涤谈僳险DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 File analyzed: qq.003 Date analyzed: 3-Jun-2009 Model: 1DA0A_DSF Analysis type: Manual analysis Diploid: 100.00 % Dip G1: 63.02 % at 44.61 Dip G2: 18.55 % at 86.71 Dip S: 18.44 % G2/G1: 1.94 %CV: 6.12 Total S-Phase: 18.44 % Total B.A.D.: 5.45 % Apoptos
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