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2014级研究生细胞生物学试题 姓名： 学号： 光学显微镜技术有哪些新发展？它们各有哪些突出优点？为什么电子显微镜不能完全代替光学显微镜？?答：（1）光学显微镜技术的新发展?? 光学显微镜技术在细胞学研究中发挥了重要作用，随着多种现代生物学技术与光镜技术的结合，使光学显微镜展现出了新的活力，也有了新的发展。光学显微镜技术主要有普通复式光学显微镜技术、荧光显微镜技术、激光扫描共焦显微镜技术、相差和微分干涉显微镜技术、录像增差显微镜技术等。（2）光学显微镜技术的优点??普通复式光学显微镜使用简单，操作方便，可以配备多套仪器使用，如暗视野显微镜。??荧光显微镜是目前在光镜水平上对特异性蛋白质等生物大分子定性、定位的最有利工具。??激光扫描共焦显微镜成像清晰，分辨率高，可以通过光学切片观察较厚样品的内部结构。??相差和微分干涉显微镜不需要染色就可以观察活细胞甚至研究细胞核、线粒体等细胞器的动态，并且具有很强的立体感。??录像增差显微镜分辨率比普通光镜提高了一个数量级，而且可在高分辨率下研究活细胞。 光学显微镜技术 主要特点 突出特点 荧光显微镜 样品进行荧光标记 只有激光荧光可以成像 激光扫描共焦显微镜 光通过一个小孔或裂缝成像 图像比较清晰，分辨率 ，只有焦平面的光成像 提高1.4-1.7倍 相差显微镜 增加一个“相差板”夸大 不需要染色，可观察活体 样品密度相位差 微分干涉显微镜 棱镜折射，增加样品密度的 增加反差，更具立体感 明暗区别 暗视野显微镜 黑暗背景下利用散色光观察 细胞及细胞器边缘轮廓清晰 倒置显微镜 照射系统和物镜颠倒位置 增加了集光器与载物台的距离，可放置培养皿观察 录像增差显微镜 计算机辅助微分干涉显微镜 提高了分辨率，可观察颗粒的运动 （3）电子显微镜不能完全代替光学显微镜的原因??尽管电子显微镜具有分辨率高这一光学显微镜无法比拟的优越性，但光学显微镜在科研中的地位是不可取代的。这可以从以下几个方面进行说明。 ①细胞生物学是在显微、亚显微和分子三个结构层次上研究细胞的，在显微水平上研究细胞需用光学显微镜，在亚显微水平上研究细胞需用电子显微镜，因此二者是在细胞的不同显微水平上观察细胞结构的。 ②普通光学显微镜样品易制备，而电子显微镜对样品要求很高。 ③电子显微镜不能观察活细胞及其动态变化。 ④普通光学显微镜操作简单，对环境和设备的要求没有电子显微镜高。 为什么说细胞培养是细胞生物学研究的最基本技术之一？答：细胞生物学是生物领域的一门基础学科，它主要研究细胞的组成，以及各个细胞器的功能和基因表达。细胞是生命活动的基本单位，也是生命活动的执行者和体现者，做这些研究当然离不开细胞。而现在生物学上的基因工程、酶工程、蛋白质工程、细胞工程、发酵工程等等这些以细胞生物学为基础的研究，他们的基本操作单元都是细胞，做这些研究也离不开了细胞培养技术，另一方面，大多数的研究都是为了产生经济效益，细胞培养技术的高低可以直接影响到一些生物产业的生产能力。细胞培养技术无疑就成为了细胞生物学的基本技术。 试述细胞以哪些方式进行通讯，各种方式之间有何不同？答：（1）细胞通过分泌化学信号进行细胞间相互通讯，这是多细胞生物最普遍采用的通讯方式，可以通过长距离或者短距离发挥作用； （2）细胞间接触性依赖的通讯，细胞间直接接触，通过与质膜结合的信号分子影响其他细胞。细胞间直接接触而无需信号分子的释放，通过质膜上的信号分子与把细胞质膜上的受体分子相互作用来介导细胞通讯。 （3）细胞间形成间隙连接使细胞质沟通。通过交换小分子来实现代谢耦联或电耦联。该方式没有信号的分泌及细胞间直接的接触。 4、概述细胞核的基本结构及其主要功能。答：（1）核被膜（包括核孔复合体）：外核膜，附有核糖体颗粒；内核膜，有特有的蛋白成份（如核纤层蛋白B受体）；核纤层；核周间隙、核孔（nuclear?pore）。?其功能为：构成核、质之间的天然选择性屏障；避免生命活动的彼此干扰；保护DNA不受细胞骨架运动所产生的机械力的损伤；核质之间的物质交换与信息交流。（2）染色质：指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构,?是间期细胞遗传物质存在的形式；染色体(chromosome)，指细胞在有丝分裂或减数分裂过程中,?由染色质聚缩而成的棒状结