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快速生物降解性 绪论 在这一节中描述了在含氧水介质中, 根据快速生物降解性来筛选化学物质的六种方法。他们是： 301A：DOC消减法 301B：CO2的变化法 （改进的斯特姆实验） 301C：MITI试验（I） 301D：密闭瓶试验 301E：改进的OECD筛选试验 301F：压力计量法 方法301A与国际标准组织(ISO)标准7827-1984相似，它取代了改进的法国标准协会试验方法，法国标准协会已经采用了ISO标准。方法301B，方法301D和方法301E是对1981年采用的早先的OECD准则的改进版。方法301C实质上与早先准则中的301C（MITI I）相同。方法301F是新的，它与方法301C类似，主要差别是使用不同的接种体。 这六种方法，经过多年积累了大量经验，包括一个OECD的开放实验室于1988年进行的比较试验（同一样品的巡回试验）。积累的经验和巡回的试验确定了这些方法可以用于对快速生物降解性的评估。然而，对于有特定物理性质的受试物，也许有更合适的方法。 以下给出的“一般程序和准备”事项包括了这六种方法的共同点。各个方法的细节分别在的相应试验中给出(301A至F)。 贯穿全文读者可参考涉及到的附录它包含了定义（附录I）、公式和有用的指南资料。 试验的一般原理 受试物溶液或悬浮液在试验培养基中经接种后在有氧但黑暗或散射光的条件下进行培养。试验溶液中接种体的溶解有机碳(DOC)浓度与受试物的DOC相比应尽可能低。尽管有受试化学物质存在下接种体细胞的活性受到一定的影响，但仍允许通过没有受试物的接种体平行空白试验来校正。用参比物进行平行试验，以检验操作程序。 在一般情况下，通过测定一些参数如DOC、CO2产生量和氧消耗来确定降解程度，通过在适当的时间间隔和频次的定量测定来确定生物降解的开始与结束。用自动呼吸计是测定是连续的。有时DOC的测定作为一个附加参数, 但通常仅限于试验的开始和结束时。特定化学物质的测定过去也常用于评估受试物的初级降解和确定形成的中间体的浓度，这在MITI方法（301C）中则是必须的。 试验周期通常为28天，但是试验在第28天前就可能结束，即生物降解曲线很快达到至少三次测定的稳定期。当曲线表明生物降解已经开始，但第28天时仍未达到稳定水平时，试验也可能超过28天，这种情况，这种化学物质将不列为“快速生物降解”类物质。 受试物的资料 为了选择最适当的试验方法，受试物的溶解性、挥发蒸汽压和吸附特性的资料是必须的。为了计算理论值和/或检查参数测定值（如ThOD, ThCO2, DOC, TOC, 和COD），应该知道受试物的结构式或分子式。为了解释得到的结果，特别是当结果非常接近“通过水平”时，受试物质的纯度或其主要成分的相关比例资料也是需要的。 受试物对细菌（微生物）的毒性（附录II）资料对选择适当的试验浓度可能是很有用的，在对低生物降解数值进行正确解释时, 可能是很有必要的。 方法的选择和适用性 倘若受试物是不挥发和无吸附性且可溶的，在受试物水溶性至少为100毫克/升时，可以用所有这六种方法来评估。对那些不溶于水，有挥发性和吸附性的受试物，表1指出了适当的方法。对极不溶于水的化学物质和有挥发性的受试物，可以按附录III所描述的方法处理，但在MITI方法中既不使用溶剂也不使用乳化剂。对一般挥发性的受试物，若在试验容器中有充分的气体空间（容器应有合适的塞子来密封），可以用DOC消减法来试验。在这种情况下，必须建立一个非生物的对照试验，以校正任何物理损失。 表1 试验方法的适用性 试验 分析方法 适用的化合物，他们是 难溶解的 挥发性的 吸附性的 DOC消减法（301 A） 溶解有机碳 - - +/- CO2的变化（301 B） 呼吸计量法：CO2的变化 + - + MITI试验（I）（301 C） 呼吸计量法：耗氧量 + +/- + 密闭瓶试验（301 D） 呼吸计量法：溶解氧 +/- + + 改进的OECD筛选试验（301 E） 溶解有机碳 - - +/- 呼吸计量法（301 F） 耗氧量 + +/- + 通过水平 快速生物降解性的通过水平就是用呼吸计法使DOC去除70%，ThOD去除60%或ThCO2产生量达到60%。在呼吸计法中降解率是较低的，因为受试化学物质中的一些碳被结合进新的细胞中，CO2产生的百分率低于添加的碳的百分率。这些通过值应在28天试验周期内的10天观察期中达到，除了下面所提及的。当生物降解率达到DOC、ThOD或ThCO210%时，10天观察期开始，必须在试验的第28天前结束。化学物质在28天后才达到通过水平时，则不认为具有快速生物降解性。1