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【2017年整理】微生物标本的正确采集
微生物检验标本的正确采集及注意事项
临床微生物标本的采集应在抗生素应用前或停药一周后进行,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。各种标本采集后应立即送检;无菌部位的标本采集应严格无菌操作。
【标本送检指征】
病人出现以下临床表现,或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。
1 发热(≥38℃)或低温(≤36℃)
2 寒战
3 白细胞增多(>10×109/L,特别有“核左移”时)
4 粒细胞减少(成熟的多形核白细胞<1×109/L)
5 血小板减少
6 皮肤、粘膜出血
7 昏迷8 多器官衰竭
9 血压降低
10 呼吸加快
几种特殊情况:
1 可疑新生儿败血症时,除发热或低温外,很少培养出细菌,应增加尿液和脑脊液培养。2 老年菌血症病人可能不发热或不低温,如伴有身体不适、肌痛或中风,可能是感染性心内膜炎,也应采取血培养。
骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的,临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者,抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。
【标本采集的容器】
各种血培养仪配套血培养瓶(分为成人瓶、成人瓶儿童瓶)【标本的采集方法】
防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题,采血前严格执行消毒程序是十分重要的。
1 皮肤消毒程序:
严格按以下三步法进行:
(1) 7%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s 以上。
(2) 用一根碘酊或聚维酮碘(碘伏)棉签消毒皮肤,1~2%碘酊作用30s 或聚维酮碘作用60s,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。
(3) 7%酒精脱碘。
对碘过敏的病人只能用70%酒精消毒,消毒60s。
待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。
2 培养瓶消毒程序
(1) 用7%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。(2) 酒精作用60s。
(3) 在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。
3 培养瓶接种程序
抽取血液后,不要换针头,直接注入血培养瓶中,轻轻颠倒混匀,以防血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养,应先将标本接种到厌氧瓶中,然后再注入需氧瓶,严格防止将空气注入厌氧瓶中。
【标本采集注意事项】
1 血培养采集的时间和频率
(1) 采血培养应尽量在抗菌药物使用之前,在24h 内采集2~3 份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养),每次2 瓶。因为研究已证实,2~3 份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。
(2) 入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者,连续3 天,每天采集2 份,可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。
(3) 对间歇性寒战或发热的患者,应在寒战或体温高峰到来之前0.5~1h采集血液,因为发热时血液中可能没有细菌。
2 采血量
成人:推荐每个血培养瓶应加的血量为~10ml,血液和肉汤比为1:5~10(体积:体积)。
儿童:因很难获得大量的血液,一般静脉采血~ml 用于血培养。
骨髓采量一般为1~2ml。
【标本的保存】
接种标本后立即送检,如不能立即送检,室温保存且勿冷藏。因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡,而使培养阳性率下降。在运往实验室的途中如果天气寒冷,应采取一定的保温措施。【标本送检指征】
1 咳嗽、咳痰:痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰。
2 咯血:肺结核病人常痰中带血。
3 呼吸困难
4 发热
5 胸痛:当炎症病变累及壁层胸膜时,会发生胸痛。
肺部感染的患者有25~50%可能发生菌血症,应同时作血培养。
【标本采集方法】
1 自然咳痰法:晨痰为佳,用温开水漱口数次(为减少口腔正常菌群污染标本),深咳呼吸道深部痰(非后鼻部分泌物、非唾液)留于无菌容器内。对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃10%NaCL水溶液,使痰液易于排出。对咳痰少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,使其咳嗽。、对咳嗽乏力或昏迷病人,可用吸痰管经鼻腔或口抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌,但不能完全避免咽喉部正常菌群感染。3、双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者,可用吸痰管经人工气道估插至叶支气管水平吸引痰液。【注意事项】
1 晨痰为好。多数病人清晨痰较多,易于采集。且清晨痰含有的病理成分较多,会增加培养的阳性率。
2 有1/4-1/2肺部感染患者可能发生菌血症,应同时作血培养。
3 能在抗菌药物应用之前采集标本,标本采集后应立即送检,否则可暂存于4℃冰箱。【标本送检指征】
1 病毒性普通感冒伴有明显咽痛时,怀疑为咽部链球菌感染,应做细菌培养。
2 细菌性咽-扁桃体炎:明显咽痛、畏寒、发热,体温可达39℃以上。
3 上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管-支气管炎,需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。
【标本的采集方法】
嘱患者先用清水漱口,由检查者将其舌外
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