原子吸收光谱分析法.ppt

毛细管气相色谱法测定野菊花挥发油中龙脑和樟脑的含量 一、实验目的 二、实验原理 三、CP-3800型气相色谱仪 四、实验步骤 五、数据处理 六、思考题 一、实验目的 二、实验原理 归一化法 定量分析的校准方式 1. 外校准模式 独立测量标准系列 (单点，多点) 校准体系与待测体系相同或基本相同 标准加入法 内校准模式 实验条件难以完全重复——减少实验条件变化造成的误差 同一次测量中，测定相对信号（待测组分信号与内标组分信号的相对强度） 待测样品和校准体系中加入一定量的某种内标物——内标法（单点校正或多点校正）合适的内标物 ~ 合适的信号 三、CP-3800型气相色谱仪 野菊花挥发油中活性成分提取 六、思考题 备注：意外状况及处理 * 复旦化学系 教学实验中心 包慧敏 1、掌握中药挥发油的水蒸馏同时溶剂萃取的方法 2、熟悉毛细管气相色谱仪的工作原理及其操作 3、掌握龙脑、樟脑GC分析及内标标准曲线法定量的方法 色谱、色谱图、色谱分析法、 定性分析、定量分析、定量校准方法 色谱法分类 一、按分离原理：依据物理或物理化学性质 吸附色谱 分配色谱 离子色谱(IC) 排阻色谱(SEC) 络合色谱和亲和色谱 二、按分离介质的几何形状 柱色谱 平面色谱 三、按流动相的物理状态 气相色谱(GC) 液相色谱(LC) 超临界流体色谱(SFC) 毛细管气相色谱 色谱定性分析 ——利用保留值进行定性 （1） 标准物质对照定性　 tR1′ （2） 相对保留值对照定性　 　　　　　r1,2 = tR1′/tR2′= k1/k2 r 值可以是文献的或测定的 （3） 利用文献进行定性 P433 　　　　　保留指数 I（Kováts指数） ● N+1, N 相邻的正构烷烃 ● 与文献对照，不需要纯物质 色谱定量分析 定量关系式： W = f?·A 或 A = S?·W W - 被测物质的量； f ? - 定量校正因子； S? - 检测器的响应灵敏度 1．峰面积或峰高的测量 2．定量校正因子 3．定量校准方法： 外标法、内标法、归一化法 标准曲线法 外标法 v.s. 内标法 1.系列标准溶液绘制工作曲线； 2.测定未知溶液，查得其浓度。 标准曲线法求解K ： 图解法、解析法 在FID上，各种烃类的相对质量校正因子都很相近，混合芳烃中各组分的百分含量近似等同于面积的百分含量 气相色谱中，把所有出峰组分含量之和以百分之百计算的定量分析方法 要求：1、样品中所有组分都能从色谱柱流出来并被检测到 2、各个组分的含量不能相差太大 归一化法定量特点：简单、方便，其结果与进样量无关，仪器条件稍有变化对结果影响不大 定量分析方法 ① 外标法 单个标样——直接比较法（标准对照法） 系列标样——标准曲线法（工作曲线法） 注意点：1. 单个标样时 cs 应与 cx 值接近；系列标样时 cx 值应处于系列溶液浓度中间 2. 用于较简单试样体系 ② 标准加入法 单个标样加入——标准加入法 系列标样加入——系列标准加入法（连续标准加入法） 注意点：1. 标准样cs 的确定: cs≥100 cx ，Vs≤V/100 保持各浓度在同一数量级，基体相似 2. 用于复杂试样体系，或试样量少时 系列标样比单个标样更准确 气相色谱仪 载气系统、进样系统、柱系统、检测系统、数据处理系统 柱系统 毛细管柱：填充柱、开管柱（涂渍方法不同 ） 毛细管柱 (1) Varian Capillary Column CP-Sil5CB 15m 0.25mm 0.25um #CP8510 (2) HP.5 Crosslinked 5% Ph Me Silicone 25m×0.32mm ×0.52um film thickness 载气系统 载气：氮气0.5MPa， 流速1ml/min，分流比 20:1 检测器：FID， 氢气0.3MPa，空气0.4MPa， 氢气/氮气流量比 1:1~1:1.5， 氢气/空气流量比1:10 气相色谱的检测器 本实验中文件xxx.mth参数设定: Method 22min (1)Injector-Middle Injector: 250℃； (2)Colum Oven: 60℃,1min; 60~280℃,12℃/min,3mi