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细胞生物学研究技术课程论文 题 目: 逆境胁迫下植物细胞的生理变化的测定 姓 名: 尹新强 学 院: 生命科学学院 专 业: 植物学 班 级: 一班 学 号: 2014116001 导 师: 蔡庆生 2014 年 12 月 8 日 逆境胁迫下植物细胞的生理变化的测定 摘要：植物在生长发育过程中往往会受到不良因素的影响，包括各种生物胁迫以及非生物胁迫，植物自身为了生存必须抵抗这些不良条件，或是适应这种条件。由于植物种属的差异性，不同植物的抗性不同，为此研究植物的逆境胁迫，对于种质资源的选择，不良环境的生态修复都具有重要意义，为此本文主要根据自己所在实验室的研究内容简单介绍在各种非生物胁迫下，植物的渗透势、细胞膜损伤、活性氧的生理变化。 关键字：逆境 胁迫 渗透势 膜损伤 活性氧 一、逆境胁迫下植物细胞的生理变化 一般植物要完成从种子然的萌发、生长、运动、开花、结果等生长发育过程，需要充足的水分、矿质营养，适宜的光照、温度和足够的氧气等环境条件。然而在自然条件下，各地所处的地理位置、气候条件、病虫害及由于工农业发展所带来的环境污染等情况的差异，即使同一地区，一年也有冷热旱涝之分。植物常常生活在多变的环境中，同动物相比，植物的空间位移比较差。植物在生活的环境中常常遭受到不良环境的袭击。因此植物在生长过程中几乎不可避免要受到不良环境的影响，譬如干旱、高盐、高温、低温、冷冻、病虫害、重金属、辐射、大气污染……有时这种影响是严重的甚至是致命的。因植物种类不同，植物会有不同的表现，有的能够生存，有的则受害致死。农业生产在我国具有十分重要的地位，为此研究植物在逆境胁迫下的生命活动规律，特别是逆境胁迫下抵御不良环境的生理分子机制，就显得十分重要。 逆境胁迫胁迫下植物生理代谢会发生变化，众多研究表明植物在干旱、高盐、低温等胁迫下，都会产生水分亏缺现象。植物吸水减少，蒸腾不足，但是蒸腾大于吸水，组织含水量减少，造成植物萎焉。植物细胞质膜、液泡膜等膜结构发生变化，渗透性加大，胞内物质明显外渗，电解质渗漏率加大，所以通常用渗漏率衡量植物抗逆性的强弱。逆境下植物的光合作用减弱，可能由于逆境条件下叶绿体结构遭到破、光合酶失活、气孔关闭增大气体扩散阻力引起的。植物呼吸速率发生改变，逆境下植物体内磷酸化酶、蛋白酶活性升高，淀粉水解，蛋白质水解加强，可溶性糖含量升高，逆境蛋白表达升高，脱落酸含量增加[1]。 研究植物逆境胁迫下生理变化往往可从渗透调节物质，膜损伤，活性氧三个方面进行分析。 首先渗透调节物质，逆境胁迫下植物通过积累各种有机或无机物质提高细胞液的浓度，降低渗透势，提高细胞吸水或保水能力。值得注意的是无机离子调节经济但积累过多会产生毒性，有机物质调节虽然无直接毒害，但消耗大量光合产物。通过测定相同植物或不同植物在胁迫组和对照组细胞内渗透调节物质的含量，无机离子有k＋＋－㎝㎝μW·㎝μW·㎝μW·㎝αCL ,α 比例常数，各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和，这就是吸光度的加和性。测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A 并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。例如取新鲜叶片或其它组织或干材料，擦净组织表面污物剪碎去掉中脉混匀。将取好的样品放入25ml容量瓶中加混合浸提液无水乙醇：丙酮=5:5 20ml放在黑暗条件下，浸泡至叶片发白，用浸提试剂定容至25ml摇匀备用。把叶绿体色素提取液倒入1cm光径的比色皿内，以浸提试剂为空白测定吸光度。选择波长663 646 和470nm，测定OD值，计算对应色素含量[8]。 光合强度、蒸腾速率和气孔导度测定：用便携式TPS-1 型光合测定仪随机测定各处理幼苗第一片真叶的光合强度、蒸腾速率和气孔导度( 各指标测定均为烟叶第一片真叶) 。每次测定5 株幼苗, 测定于每日13: 00～14: 00时进行, 测定光强为1 0