ImageLab中文操作手册【DOC精选】.doc

Image Lab? 中文操作手册 Fast and Reliable Image Lab全自动图像获取和分析软件用于Molecular Imager ChemiDoc? XRS+、Molecular Imager Gel Doc? XR+ 和 Criterion Stain FreeTM 成像系统，可应用于凝胶电泳和转印膜的数字成像和分析，而自动化的工作流程能加速图像获取步骤及参数优化，并针对调整好的凝胶或转印膜影像进行系统性分析，进而得到所需的分析数据结果。 一、软件操作界面 1. 主窗口工具列 档案管理 分析数据Results Data 2. 显示工具列 3. 分析工具列 （1）工具（Image Tools） （2）及条带工具（Lane and Band Tools） （3）分子量工具（MW Molecular Weight） （4）自动定量工具（Quantity Tools） （5）注释工具（Annotation Tools） （6）手动定量工具（Volume Tools） 二、使用Image Lab 软件进行化学发光取流程 1. 建立像取： 在（Gel Imaging）对话框中选择Chemi（化学发光）应用程序 在区域（Imaging Area）对话框中的下拉式选单中选择合适的样品大小（非必需） 选择曝光（Image Exposure）方法，可以评估曝光时间并以手动设定（Manual Exposure），或是使用信号累积模式（Signal Accumulation Mode，SAM）来进行。 在建立一个化学发光的程序时最难的任务就是图像曝光的确定，因为您想获得一个充分利用了相机大的动态范围的图像。过短的图像曝光时间可能使高于膜背景的微弱信号不能被识别；过长的图像曝光时间能够使得某些条带饱和（也就是说，超出了相机准确报告信号的能力）。如果这是您第一次用ChemiDoc XRS+分析化学发光样品，您需要在使用手控或信号累积模式（SAM）之前决定一个合适的成像时间框架。获得这个信息的最好的方式是取得一个相对短的手工曝光并利用Image Lab里的工具估计最适的曝光时间。 2. 手动曝光 选择手动设定曝光时间（Manually set exposure time）并在读秒框中输入10秒。 选择Highlight saturated pixels 。 把胶置于透射箱的中心位置。 在程序窗口中点击按钮。 观察显示器中样品的实时像，打开照胶系统的门并移动样品直到位于视野的中心区域。 可利用照相机的变焦滑板调节区域的大小。 选择按钮。 若所需的像出现在计算机的显示器上，确认像中是否包含红色的饱和区域。若有饱和区域存在，请重新以较短的曝光时间来取像。若无饱和区域存在，则可移动鼠标置于最暗的条带之上，在较低的右下角Image Lab窗口中观察信号的强度数值。如图中显示强度为1994，照相机能记录的最大值的32分之一（最大值为65,535）。用你的最初的10秒曝光再乘以30就可在照相机的最大动态范围附近你的样品。若你只需针对单一像的时间进行评估，可直接在手动曝光区域中输入300。 3. 信号累积模式（Signal Accumulation Mode，SAM） SAM按钮，然后按Setup按钮。一个新的对话框会跳出来，其包含有可输入细分的成像时间的领域。 在这个例子中，我们已经输入了小于和大于我们原始的300秒曝光估计时间，因为我们有理由相信准确的成像时间将会在这些时间之中。我们总共想要5个成像，推测其中一个将会与最佳成像极为接近。一个您的SAM设定的图像显示出现在对话框里。 而SAM设定的影像显示对话窗口，在您选择按钮后再点选按钮，窗口会显示相关进度图标来说明整体像取的时间。在250秒取第一个像，同时小缩图会出现在窗口的下方，以此类推整个过程将持续到取所有的像。 就像前面做过的那样，通过移动鼠标在图像上，您能判定强度值。您也可以通过使用位于程序窗口左边的图像转换窗口（Image Transform）中的调节划片改变图像的表观。在SAM程序中的任何地方您都能通过点击缩略图查看图像。若确定调整到符合您要求的像时，点击 按钮舍弃其它不适合的像来完成取像的程序。也可在SAM取像的过程中或之后来保存需要的像，直接点选右键单点缩图窗口内的像即可进行存盘保留下来。SAM图像会导致背景信号的平均。当较多的图像被获得时，在背景强度水平附近的弱的信号将会变得难以识别。如果辨别最弱的信号很重要，我们推荐在合适的时间下获得单一的成像。 三、建立全自动图像获取及分析（Creating Pr