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二最低检测限与线性范围试验
第二次实验 血清总蛋白测定、 最低检出限 线性范围试验 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 教学要求与目的 1.掌握血清总蛋白测定原理和测定方 法，了解其临床意义。 2.掌握最低检出限、线性范围的定义、 评价方法及用途。 3.熟悉最低检出限、线性范围的实验 方法。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 教学内容 1.双缩脲法测定血清总蛋白。 2.最低检出限测定。 3.线性范围试验。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、血清总蛋白测定 凯氏定氮法 参考方法 双缩脲法 常规方法 酚试剂法 染料结合法 浊度法、紫外光谱法 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. （一）实验原理 血清中蛋白质分子中的肽键在碱性溶液中能与Cu2+作用生成稳定的紫红色络合物，此反应和两个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似，故称双缩脲反应。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 在540nm波长处有吸收峰，在一定浓度范围内其吸光度增加与蛋白含量成正比，由此可求得蛋白质含量。 蛋白质 + OH Cu 2+ 紫红色络合物 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. （二）实验试剂 1、双缩脲试剂 氢氧化钠、酒石酸钾钠 硫酸铜、碘化钾 2、标准液 总蛋白 50g/L Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. （三）操作方法 1、操作参数： 波长：540nm 温度：37℃ 测定模式：终点法 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2.操作步骤 （ul） DH2O 标准液 血清 双缩脲试剂 B 20 1000 S 20 1000 U 20 1000 混匀，37℃水浴10分钟，在540nm波长处，用空白管调零，读取各管吸光度。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 3、计算 血清总蛋白(g/L) = 测定管吸光度 标准管吸光度 × 蛋白标准液浓度（50g/L） 参考值：60－83g/L Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. （四）注意事项 严重溶血和黄疸可使测定结果偏高,可 作标本空白管消除。 2.脂肪乳糜干扰比色，可加丙酮离心。 3.右旋糖酐可使测定产生混浊影响结果。 Evaluation onl
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