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养殖环境微生物监测及其传染效果与气溶胶的发生、传播和感染机制 公示材料 奖 种 省自然科学奖 项目名称 养殖环境微生物监测及其传染效果与气溶胶的发生、传播和感染机制 完成人姓名 李晓霞 技术职称 副教授 排序 第3 位 完成人单位名称 泰山医学院 排序 第3 位 项目简介 研究内容、发现点、科学价值、同行评价。 针对规模化畜禽饲养动物健康、环境卫生和牧场的废气排放造成的社区环境污染，以及近十几年来畜禽重大传染病和动物源性人兽共患病如禽流感、猪流感的流行和‘超级细菌’产生的公共卫生问题，对畜禽场环境监测，建立了试验模型对禽流感病毒、新城疫病毒、蓝耳病病毒和马立克氏病病毒的气溶胶发生、传播及感染机制研究，阐明其气源性传染的过程与规律。 （1）系统地对不同饲养方式、结构和规模的畜禽场舍的微生物气溶胶及其传播监测。即对养鸡、猪、牛、兔等场舍（共126个场）及其场舍外不同距离（10m—500m）的气载需氧菌总数、厌氧菌总数、革兰氏阴性菌及内毒素、真菌及真菌毒素监测。获得了其含量及不同菌群的构成成分；根据指示菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌的含量统计和细菌基因组学鉴定，确认了养殖环境微生物气溶胶向场舍外包括社区居民环境的扩散，在200m之内污染严重。借此，评估了畜禽舍环境卫生和疫病流行风险及对从业人员的传染危害，提出了防控措施。 （2）运用基因组学理论及技术PFGE、ERIC-PCR和REP-PCR对牧场舍内、外环境中分离的指示细菌溯源鉴定。发现动物粪便中分离到的大肠杆菌与从舍内空气中的部分大肠杆菌（鸡舍34.1%、牛栏41.8%）来源相同，从动物舍外下风方向（10-200m）分离的多数大肠杆菌来源于舍内空气或粪便。从本质上揭示了牧场动物产生的微生物气溶胶不仅在畜禽群内扩散，而且能向场舍外环境传播，构建了气源性传染病的传播模式。有公共卫生和流行病学意义。 （3）对养鸡、猪、牛场（共33个）舍内、舍外环境分离的380株气载大肠杆菌携带主要毒素基因的鉴定。鸡舍携带LTa基因的菌株最多为53.85%（63/117）；猪舍携带LTa和STb基因的菌株最多分别为（42/120）和（36/120）；牛舍58.74%大肠杆菌携带1至4种毒素基因。阐明了畜禽气源性传染病病原的传播过程。 （4）应用多重PCR等技术对养鸡、猪、牛场舍内、舍外环境分离的426株肠球菌和149株金葡菌耐药基因、即对β-内酰胺类抗生素TEM等基因进行了检测，明确了其向场外社区环境的传播。发现了传统的超级细菌：在养鸡场舍内、外8株金葡菌为MRSA-耐甲氧西林金葡菌，并携带耐药基因；检测到36株肠球菌携带耐万古霉素vanA或vanB基因。发现14.55%（62/426）的肠球菌对β-内酰胺酶类抗生素耐药等。揭示了养殖环境耐药菌和‘超级细菌’的产生与传播状况，揭示了滥用抗生素导致的风险和危害。 （5）对养殖环境气溶胶粒子直径Dae50及其评估，约3%-13%属于PM2.5范围。在鸡猪牛舍分别发现3.7%、4.9%、13.4%的粒子Dae50＜1微米，这些粒子能够到达肺泡，对动物及饲养员的感染危害更大。该结果为养殖环境饲养卫生管理及卫生标准的制定提供参考。 （6）建立了AIV、NDV、PRRSV、MDV气溶胶的发生、传播及感染模型，阐明其气源性传染的机制与风险。 申请人从1994来从事该领域工作,37名博硕研究生参与,发表SCI论文33篇,获得2项专利。 同行专家评价指出，“该研究系统严谨，内容丰富，工作量很大，研究方法先进而规范。多项理论创新，发表多篇高水平论文，总体上与同类研究相比具有国际先进水平，部分领域达到国际领先水平”。 二、 完成人对项目技术（学术）创造性贡献 建立了鸡新城疫病毒气溶胶发生、传播及感染的实验模型，掌握了NDV气溶胶的发生、传播与感染机制。获知了人工感染NDV的SPF鸡排出NDV形成气溶胶的时间及其浓度变化；NDV气溶胶可以扩散到至少20m，并可以感染20m的健康鸡群；初步确定了NDV气溶胶对SPF鸡的感染及致死剂量，并与其它感染途径做了对比；在生产鸡舍中采集气体，并对其中的气载NDV进行检测、分离鉴定及其F基因重要片段克隆及遗传变异分析，结果表明生产鸡舍中确实存在气载NDV，且呈多基因型存在，疫苗株也广泛存在于鸡舍空气中；应用ERIC-PCR 动态检测了感染NDV气溶胶的SPF鸡肠道菌群的变化。发表SCI收录论文2篇（影响因子分别为：2.370及2.077）。 对第二项科学发现有贡献。 完成人提供的代表性论文、论著目录 Xiaoxia Li, Tongjie Chai, Zhiliang Wang, Cuiping Song, Hongjing Cao, Jingbo Liu