神经信号与电生理学方法(li)材料.ppt

神经系统的信号传递与电生理学研究方法 一、神经系统的信号传递 二、电生理学方法介绍 一、神经系统的信号传递 二、电生理学方法 细胞外纪录 (extracellular recording): 细胞内纪录 (intracellular single unit recording)： 电压钳（voltage clamp） 膜片钳（patch clamp） 脑电图 (EEG) 诱发电位（evoked potential） 微电泳（microelectrophoresis） 抗体微量注射 正电子发射断层扫描术 磁共振成像术  ?（1) 阴极射线示波器（oscillograph）： （2）生物电放大器(amplifier): 频率相应范围大（通频带从0~100kHz)，有足够高的放大能力，低噪声，高输入阻抗，高的辨差比。 （3）电子刺激器（electronic stimulator）: 矩形脉冲：刺激强度（幅度: 最大瞬时值，0.001~200V之间，连续可调）、时间（波宽：10?s~1s）、频率(波宽和延迟时间之和小于频率的倒数)、延迟 ；刺激方式：单，连续，双脉冲刺激；同步输出：触发其他需要与刺激同步的仪器（示波器，微电泳，照相等）一起工作。刺激隔离器（insulator）。 （4） 储存和分析电生理实验结果的仪器： * * 医学院生理学研究所 李景新1. 神经元轴突内神经活动的电变化 Measuring the resting membrane potential 1) 电信号 Methods of Recording Action Potentials 1)电信号 神经纤维静息电位与动作电位波形与产生机制 The voltage-gated channel Structure of the voltage-gated sodium channel 2. 神经元-神经元间化学性突触传递 Synaptic arrangements in the CNS Various sizes of CNS synapses 2. 神经元-神经元间化学性突触传递 2. 神经元-神经元间化学性突触传递 A membrane ion channel ?The properties: ion selectivity and gating. A membrane ion channel ?The properties: ion selectivity and gating. Transmitter actions at G-protein-coupled receptors. The binding of neurotransmitter to the receptor leads to the activation of G-proteins. Activated G-proteins activate effector proteins, which may be (a) ion channels or (b) enzymes that generate intracellular second messengers. 常用的主要仪器 电记录的技术 (A) 细胞外记录法记录法记录单个细胞或一群细胞的电活动。 (B) 微电极细胞内记录法记录膜内外的电位差：静息电位和动作电位。 (C) 膜片钳记录法记录当膜上单个通道开启或关闭时的电流。 ?工作原理：把引导电极安放在神经组织的表面或附近引导神经组织的电活动。活动部位的神经元去极化，未活动部位极化状态，在容积导体中两部位电位不同，电流流动，放置在细胞表面的电极会纪录出两者间的电位差。 ?优点：方便，电极不插入细胞。 ?特点：细胞外电位的波形因记录细胞的不同部位而异 细胞外纪录 (Extracellular Recording) Wang et al., J Comp Neurol, 2001 膈神经及呼吸相关神经元放电记录 细胞内纪录 Intracellular Single Unit Recording 细胞内纪录 Intracellular Single Unit Recording 由于插入神经元内胞体并记录细胞内电位的微电极技术的发展，Eccles等首先将微电极插入脊髓运动神经元的胞体，记录哺乳类动物脊髓的大运动神经元胞内电位。 ?运动神经元的胞体直径70?m; ?微电极尖端直径0.5 ?m； ?跨膜电位差60~80mV。 图 用微电极在猫脊髓运动神经元内记录的突触后电位 A.B.C:三种不同的阈下刺激； D:10次刺激引起的峰电位。 图 刺激神经在单根肌纤维的终板上所诱发的电位