第二章植物组织培养实验室的基本设备.ppt.pptVIP

三峡大学 编写与制作 李晓玲 Copyright 1.0 第二章 植物组织培养实验室的基本设备 和一般技术 【主要内容】 【学习目的与要求】 了解植物组织培养实验室的设置及基本设备，学习基本仪器设备的使用原理与方法，掌握植物组织培养的一些基本技术。 一、组培实验室的设置 1. 化学实验室 主要进行器具的洗涤、干燥和保存;药品的称量、溶解及配制;培养基的分装、包扎和灭菌;植物材料的预处理,培养材料的观察分析等。 2. 接种室 主要进行植物材料的接种.培养物的转移.试管苗的继代等. 3. 无菌培养室 是人工条件下培养接种物及试管苗的场所. 4. 洗涤室 若需成批生产时,需要一间单独的洗涤室. 组培实验室的设置 5.观察室 放置显微镜.解剖镜或照相设备,便于对实验材料进行认真观察、分析和照相。 6.储存室 暂时不用的器皿.用具的存放,也可用作种质保存。 7.温室 用于试管苗的炼苗、移栽;植物材料的预培养等。 1. 化学实验室 药品的称量、溶解和保存注意事项： 第一，药品称取要精确，大量元素用于托盘天平称，其他用分析天平。 第二，称好的药品分别放于小烧杯中，先用少量蒸馏水完全溶解，最后倒入容量瓶，定容到规定的体积；铁盐应先溶EDTA钠盐，再用该溶液去溶解硫酸亚铁， 定容到规定的体积，以免发生氧化。 第三，容量瓶中的母液应倒入棕色试剂瓶。贴上标签，放入冰箱保存。母液应勤配快用，若放置日久，发现浑浊、絮状沉淀，则失效不能再使用。 ２.接种室 ２.接种室 超净工作台的工作原理是，鼓风机将外界空气从低效过滤器粗滤尘埃，再将空气通过特制的微孔泡沫塑料片层叠组成的高效过滤器过滤消毒，它能除去直径0.3微米的尘埃、细菌和真菌孢子，吹出的气体形成连续不断的无尘无菌的空气层流，以0.35-0.55米／秒的流速送到操作台面。超净工作台使用前应用紫外灯照射30－40分钟 。 ２.接种室 超净台使用时间长了过滤器会堵塞，一般低效过滤器每半年清洗一次，高效过滤器视情况3--4年更新一次。每周开紫外灯2小时杀菌一次 ３.无菌培养室 无菌培养室最重要的是要恒温、恒湿、无尘且空气流通。温度应维持在25度左右，相对湿度应在50%-60%。培养室内有规律的安放培养架或摇窗。 培养架可以是铝合金、三角铁、不锈钢或木制框架，整个架子的高度可根据房间的高度确定，以充分利用空间，每个架子分为若干层，每层的层高应在40CM左右，太高浪费空间，太低则上下层温度影响较大。架宽应在45CM左右，每层安装2支40W日光灯。 ３.无菌培养室 　培养室内所有光照和黑暗时间由定时器自动控制。 整个培养室内还应装有多个紫外线灯，以便能定时对整个房间进行杀菌处理，特别是在夏天潮湿、霉雨季节，最好每天在晚上用紫外线灯杀菌30分钟以上。 ３.无菌培养室 无菌室应定期用70%酒精或0.5%苯酚喷雾降尘和消毒，用2%新洁尔灭抹拭台面和用具(70%酒精也可)，用福尔马林(40%甲醛)加少量高锰酸钾定期密闭熏蒸，配合紫外线灭菌灯(每次开启15分钟以上)等等消毒灭菌手段，以使无菌室经常保持高度的无菌状态。 ３.无菌培养室 接种箱内部也应装有紫外线灯，使用前开灯15分钟以上照射灭菌，但凡是照射不到之处仍是有菌的。在紫外线灯开启时间较长时，可激发空气中的氧分子缔合成臭氧分子，这种气体成分有很强的杀菌作用，可以对紫外线没有直接照到的角落产生灭菌效果。由于臭氧有碍健康，在进入操作之前应先关掉紫外线灯，关后十多分钟即可入内。 二、组培实验室常用仪器设备及必要的器皿 常用仪器设备： 1.电子天平　精度高，称量快，但价高。　　 DT－200 精度0.1g 　Max 200g 　　　　　　　　 用于称取蔗糖和琼脂等 FA1004 精度0.1mg Max 100g 　　　　　 用于称取微量元素和植物激素及微量附加物 ２.高压蒸汽灭菌锅　　 是最基本的设备，用于培养基.器械等的灭菌．　　上海申安　LDZX-40BI 　立式自动电热压力蒸汽灭菌锅 二、组培实验室常用仪器设备及必要的器皿 3.烘箱　洗净后的玻璃器皿，如需迅速干燥，可放在烘箱内烘干，温度以80-100℃为宜。若需干热灭菌，温度升高至150-160 ℃,持续1-3小时即可。 4.冰箱　某些试剂．药品和母液需低温保存，有些材料需低温处理，需要使用冰箱。 5. 酸度计 培养基中的PH值十分重要,因此配制培养基时,需要用酸度计来测定和调整.一般用小型酸度测定仪,即可在配制培养基时使用,也可测定培养过程中PH 值的变化.若不做研究,