实验七、果蝇的三点测交汇报要点.pptxVIP

实验七、果蝇的三点测交汇报总结 --上午第五组反交 汇报人： 汇总人： 组员： 一、实验目的 1、掌握三点测交的原理及方法； 2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法； 3、了解绘制遗传学图的原理和方法 二、实验材料仪器 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)品系： 野生型果蝇（+++）： 红眼、长翅、直刚毛 三隐性果蝇（wmsn3）：白眼、小翅、焦刚毛 反交所选果蝇 母本：三隐性雌蝇 父本：野生型雄蝇 三、实验仪器、药品 实验仪器： 体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。 实验药品：乙醚、 玉米粉、琼脂、红塘、 酵母粉、丙酸等。 四、实验原理 连锁交换定律： 处在同一染色体上的两个或两个以上基因遗传时，联合在一起的频率大于重新组合的频率。重组类型的产生是由于配子形成过程中，同源染色体的非姊妹染色单体间发生了局部交换的结果。 三点测交： 三点测交就是通过一次杂交和一次测交，同时确定三对等位基因（即三个基因位点）的排列顺序和它们之间的遗传距离，是基因定位的常用方法。 主要过程： 用三显性纯合体和三隐性纯合个体杂交，获得三基因杂合体（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。 位于同一条染色体上的基因是连锁的，同源染色体的基因之间会发生一定频率的交换，使子代中出现一定数量的重组型。重组型出现的多少，即重组值反映基因间发生交换的频率的高低。根据基因在染色体上直线排列的原理，基因交换频率的高低与基因间的距离有一定的对应关系。 基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。如果基因座位相距很近，重组率与交换率的值相等，直接将重组值作为基因图距；如果基因间相距较远，两个基因间往往发生两次以上的交换，必须进行校正。两个基因间的单交换往往影响邻近两个基因的单交换，使实际观察到的双交换值低于预期值（两个单交换频率的乘积），因为每发生单交换，邻近发生交换的机会减少，这叫干涉。一般用符合系数表示干涉的程度。? 符合系数＝?观察到的双交换频率／?两个单交换频率的乘积? 以三隐雌蝇与野生型雄蝇杂交为例: 五、实验步骤 1、选处女蝇:将母瓶中的果蝇全部麻醉处死或释放，8-12小时内收集处女蝇3只，和3只雄蝇一起转移到新的培养瓶中，做好标记，恒温（大约27摄氏度）培养，10.29-30； 实验于10.28开始，第一次麻醉果蝇不知道乙醚使用量和处理时间，导致挑选雄蝇全部死亡，重新挑选雄蝇;然后，挑选好的处女蝇，没做好标记工作，导致其他小组拿错，于是，10.29重新实验，30号才选好亲本。 母本：三隐性雌蝇 父本:野生型雄蝇 2、5天后，释放亲本，发现培养基已有一些幼虫和蛹（如下图），如下图，11.4；11.2观察，发现一只雌蝇死亡，最后亲本只剩2只雌蝇和3只雄蝇； 3、6天后，F1代成蝇出现，集中观察记录F1代果蝇表型和性别；然后，从中挑选1对F1代果蝇，转至新的培养瓶中恒温培养，如下图，11.10-11.12； 11号观察发现F1代5对果蝇均死亡，仍是麻醉过度的致死；12号于旧的培养瓶中重新挑选果蝇3对，因为棉花塞太小，果蝇逃走，又果蝇分给其他组3对，导致最后就一对F1代果蝇作为F2代的母本。 4、9天后，释放F2代亲本，培养瓶中出现成虫；期间发现培养瓶中出现一些幼虫和蛹，如下图； 5. 3天后，开始观察记录，观察F2代果蝇眼色、翅形和刚毛形态，连续统计7天，11.24--11.31； 由于培养基后期被微生物感染，以及培养箱出现问题，果蝇于室温中培养，许多幼虫、卵和蛹干死，如下图。 六、实验结果和分析 实验结果： 一、F1代果蝇表型以及其性别统计表 三隐性果蝇 野生型果蝇 雄 15 0 雌 0 20 由上表可知，F1代果蝇，雄蝇均为野生型，雌果蝇均为三隐型。 二、F2代果蝇表型统计表 表型 基因型 数量 白眼 小翅 卷刚毛 102 红眼 长翅 直刚毛 92 白眼 长翅 直刚毛 38 红眼 小翅 卷刚毛 36 红眼 小翅 直刚毛 29 白眼 长翅 卷刚毛 16 白眼 小翅 直刚毛 3 红眼 长翅 卷刚毛 4 合计 320 由上表可推断出果蝇X染色体上三个基因的顺序如下： 实验结果分析： 基因交换值计算公式 交换值=相应表型果蝇数量/果蝇总数量 102 92 38 36 29