微生物基因表达的调控简析.pptVIP

二、λ噬菌体克隆载体 将野生型λ噬菌体DNA进行改造后建成，主要是去掉噬菌体 DNA上过多的常用限制酶的酶切位点，及对非必要基因区域 进行改造。 特点： 1）它的分子遗传学背景十分清楚 2）λ噬菌体载体的容量较大。一般质粒载体只能容纳10多个kb。 而λ噬菌体载体却能容纳大约23kb的外源DNA片段。 3）具有较高的感染效率。其感染宿主细胞的效率几乎可达100％， 而质粒DNA的转化率却只有0.1％。 4）和质粒相比，λ噬菌体具有更为狭窄的寄主范围，因此更加安全 （参见P260） 与溶原性相关的基因可以被外源DNA取代而不影响λ噬菌体的 感染、复制和裂解宿主细胞的能力。 经过体外基因操作和包装后形成重组 噬菌体，可以通过正常的感染途径进 入宿主细胞； 重组噬菌体DNA也可不经过体外包装 而直接通过转染（转化）方式进入宿 主细胞； 质粒和噬菌体载体都可用于 构建基因文库； 但后者更有优势： 容纳的外源DNA片段较大； 以感染途径进入宿主细胞的 效率比转化高； 三、柯斯质粒载体 柯斯质粒载体 （cosmid vector）， 又称粘粒，是由λ 噬菌体的粘性末端 和质粒构建而成。 Cosmid (cos site-carrying plasmid) 带有粘性末端位点( cos) 的质粒 （参见P260） 特点： 1）具有λ噬菌体的特性：在克隆了外源片段