维生素c的定量测定.pptVIP

维生素C的定量测定 一、原理： 维生素C又称抗坏血酸，还原型抗坏血酸能还原染料2,6—二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸，2,6—二氯酚靛酚的钠盐水溶液呈兰色，在酸性溶液中呈玫瑰红色，当其被还原时就变为无色，因此，可用2,6—二氯酚靛酚滴定样品中还原型抗坏血酸，当抗坏血酸完全被氧化后，稍多加一点染料，使滴定成淡红色，即为终点，如无其它杂质干扰样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。 维生素C的定量测定 二、试剂 1、偏磷酸醋酸溶液：取15克偏磷酸（用时研细）溶于40毫升醋酸及20毫升之水混合液中，然后用水稀释至500毫升，过滤后贮入玻塞品中。 2、标准2,6—二氯酚靛酚液：取0.25克2,6—二氯酚靛酚溶于700毫升蒸馏水中（用力搅动），加入300毫升冷酸缓冲液（预先配制KH2PO4—9.078克/升，Na2HPO4.2H2O—11.867克/升水溶液，用时以KH2PO4/ Na2HPO4.2H2O=4/6的比率将其混合。pH为6.9~7.0，日过滤，滤液贮于有色瓶中，临用时，以标准抗坏血酸溶液标定）。 维生素C的定量测定 3、2,6—二氯酚青定酚液标定： 标准维生素C溶液（校准时再作），以少量偏磷酸溶液溶解0.1克维生素C于100毫升容量瓶中，再以该液稀释至刻度。 在三个100毫升锥形瓶中，各置5毫升偏磷酸醋酸液，再各加2毫升标准维生素C溶液，摇匀。用上面所制2,6—二氯酚靛酚滴定，呈玫瑰红色保持30秒钟不褪色为止。记下所用2,6—二氯酚靛酚液平均值，再以同样方法作一空白实验，取7毫升偏磷酸醋酸液加水若干毫升（相当于以上所用之2,6—二氯酚靛酚之滴定量），仍用2,6—二氯酚靛酚滴定之。将第一次滴定的量减去空白实验的量，即为标准维生素作用之量，求出1毫升之2,6—二氯酚靛酚—若干毫克之维生素C。 维生素C的定量测定 三、操作： 提取：用自来水冲洗检样，再以蒸馏水清洗，用纱布或吸水纸吸干表面水份，然后称取20克，剪碎，在研钵中形成浆状，倾入20—30毫升3%偏磷酸醋酸液，搅动，抽气过滤液经漏斗流入100毫升容量瓶中，残渣再以20毫升偏磷酸醋酸液提取三次，滤液及洗涤液皆流入该容量瓶中，以蒸馏水稀释至刻度，加塞摇匀。 滴定：吸取10毫升提取液注入一小三角瓶中，加5毫升偏磷酸醋酸液，混合均匀，以2,6—二氯酚靛酚滴定，并不断摇动，至溶液显玫瑰红色保持30秒钟不褪色为止。 吸取15毫升偏磷酸醋酸液，加水若干毫升（相当于以上滴定所用2,6—二氯酚靛酚之量）作一空白试验，用同样方法，以2,6—二氯酚靛酚滴定之。 维生素C的定量测定 四、结果计算： VC% (mg/100g) = （VA —VB）×已知维生素C毫克数×100 ×100/所用提取液毫升数×样品重 式中： VA—样品实验所用2,6—二氯酚靛酚 VB—空白试验所用2,6—二氯酚靛酚 注：样品中某些杂质亦能还原2,6—二氯酚靛酚，但速度均较抗坏血酸慢，故终点以淡红色存在30秒钟为准。 * * * * *