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《生物化学实验》教学大纲.doc
《生物化学实验》教学大纲
一.实验目的 二.实验内容 三.实验学时安排 四.考试方法 五.参考教材
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一.实验目的 生物化学是一门实验性学科,其所有知识均来自于实验。本课程着眼于学生学习和掌握生物化学课程的基本理论、基本知识以及实验技能,培养学生具有初步分析问题和解决问题的能力。 生物化学实验课通过学习滴定、比色、纸层析、电泳、生化制备等基本实验技术,分析研究糖、脂、蛋白质、核酸、酶、维生素等生化物质及某些代谢过程,培养学生具有初步的科学实验能力及严格的科学作风,同时验证生物化学的某些基本理论知识,加深感性认识,并锻炼初步的综合实验能力。
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二.实验内容
实验一 糖的呈色反应及还原糖的检验一.实验目的 学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法;了解鉴定还原糖的方法及其原理。二.实验内容 Molish反应、蒽酮反应、Seliwanoff反应、Bial反应、Fehling反应。 实验二 脂类组成对脂类单分子层通透性的影响一、实验目的 学习制作脂类单分子层和鉴定它的原理及方法,比较不同脂类所形成的脂类单分子层通透性的差异。二、实验内容 以脂类单分子层作为模式膜,用甲烯蓝为指示剂,观察不同脂类单分子层通透性的影响。实验三 蛋白质浓度的测定(1)——Folin-酚法一、 实验目的 学习Folin-酚法的原理及方法,制备标准曲线,测定未知样品中蛋白质含量。二、实验内容 制备Folin-酚法标准曲线,测定未知样品蛋白质浓度。Folin-酚法标准曲线Folin-酚法Folin-酚
实验四 蛋白质浓度测定(2)——紫外线吸收法一、 实验目的学习紫外线(UV)吸收法测定蛋白质含量的原理,了解紫外分光光度计的构造原理,掌握它的使用方法。二、实验内容标准曲线的绘制及未知浓度蛋白质溶液的测定。
实验五 氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法一、 实验目的 了解氨基酸滤纸层析的原理及操作方法。二、实验内容 进行氨基酸的纸层析及定性鉴定。
实验六 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳一、 实验目的 了解电泳的一般原理,掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术,测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。二、实验内容 进行血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳并进行结果判断。
实验七 蛋白质和氨基酸的呈色反应一、 实验目的 学习常用的鉴定蛋白质氨基酸的方法及其原理;学习几种特定氨基酸的特殊颜色反应及其原理。二、实验内容 双缩脲反应、茚三酮反应、黄色反应、茚三酮反应。
实验八 蛋白质的沉淀、变性反应一、 实验目的 了解蛋白质的沉淀反应、变性作用和凝固作用的原理及它们的相互关系;学习盐析和透析等生物化学的操作技术。二、实验内容 可逆沉淀反应,不可逆沉淀反应。
实验九 酵母RNA的提取与地衣酚显色测定法一、 实验目的 了解并掌握稀碱法提取RNA及地衣酚显色法测定RNA含量的基本原理及具体方法。二、实验内容 用稀碱法提取酵母细胞RNA,并用地衣酚显色法测定。实验十 动物组织DNA的制备一、 实验目的 学习盐溶液法从动物组织中提取脱氧核糖核酸的原理及操作方法。二、实验内容 以猪肝为原料用不同浓度的盐溶液提取其中的脱氧核糖核酸。
DNA含量的测定
四.作业与思考
结合本人实验操作的体会,试述在提取过程中应如何避免大分子DNA的降解和断裂。
DNA制品都可以用哪几种方法测定其含量?试从它们的原理、准确性等方面加以比较。
实验十一 核酸浓度测定(1)——定磷法一、 实验目的 掌握利用核酸定磷测定法测定核酸的含量。二、实验内容 通过对总磷、无机磷的测定,计算未知样品中的核酸浓度。
实验十二 核酸浓度测定(2)——紫外线吸收法一、 实验目的 了解紫外线(UV)吸收法测定核酸浓度的原理,并进一步了解紫外分光光度计的使用方法。二、实验内容 用紫外线吸收法测定核酸浓度。
实验十三 维生素A、B1、B2的定性鉴定一、实验目的 了解维生素A、B1、B2定性鉴定的原理及方法。二、实验内容 维生素A的定性鉴定以及维生素B1、B2的定性鉴定。
实验十四 维生素C的定量测定一、实验目的 了解用2,6—二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量的原理及方法。二、实验内容 用2,6—二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素C的含量。
实验十五 酶的激活剂、抑制剂及温度对酶的活性的影响一、实验目的 了解酶反应的激活剂、抑制剂,了解温度对酶活性的影响。二、实验内容 了解酶的激活剂、抑制剂、酶的最适反应温度。
实验十六 血清谷丙转氨酶的测定(King氏法)一、 实验目的 掌握血清谷丙转氨酶(SGP
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