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论文-Thl7细胞分泌因子IL-17及IL-22在肝组织免疫病理中的作用研究
毕业论文
课题名称-22
肝组织免疫病理中的作用研究
专 业
学 号
学生姓名
指导教师
起讫日期
工作地点
Thl7细胞分泌因子IL-17及IL-22在肝组织免疫病理中的作用研究
摘要:目的 检测乙型病毒性肝炎(HB)患者血清中IL-17、IL-22水平变化规律,为肝病诊疗提供新的指标和方向。方法 选择门诊和住院乙型病毒性肝病患者84例,采集血液标本,分别检测IL-17、IL-22、HA、LN、Ⅳ、TBIL-22、HA、LN、Ⅳ-22水平升高均有显著性意义 (P0.01)。随肝损害严重程度加剧,IL-17及IL-22表达水平依次增高(P0.01)。IL-17、-22分别与HA、LN和Ⅳ型胶原蛋白含量水平呈显著正相关(r=0.934,P0.01;r=0.835,P0.05;r=0.913,P0.01)、(r=0.951,P0.01;r=0.869,P0.05;r=0.962,P0.01)。IL-22与TBIL、γ-GT呈正相关(r=0.384,P0.05;r=O.358,P0.05)。结论 检测IL-17、IL-22并结合相关指标对慢性肝炎、肝纤维化和肝癌流行病学调查、临床诊断、病情分析及预后判断均具有重要价值。深入研究IL-17、-22等细胞因子通路与肝脏损伤机理,为各类肝病免疫干预治疗提供新的靶点。
关键词 辅助性T细胞17; 白细胞介素-17; 白细胞介素-22; 乙型病毒性肝炎
长期以来,在乙型病毒性肝病的发病机制中,免疫应答及细胞因子的作用一直受到国内、外学者的广泛关注。Th17细胞(T help cell 17)是一类新发现的效应性CD+4Th细胞亚群,独立于Th1和Th2[1]。它的发现弥补了传统的Th1/Th2模式在解释疾病免疫病理机制中的局限性,成为近年研究的热点。目前研究发现,Th17细胞分泌的IL-17(Interleukin-17)、、-21(Interleukin-21)、IL-6(Interleukin-6)、IL-22(Interleukin-22)和肿瘤坏死因子а(TNFа)等细胞因子参与肝脏损伤及再生过程,在脂肪肝、自身免疫性肝病及肝脏肿瘤中发挥重要作用[2],因此,本文就乙型病毒性肝病患者外周血Thl7细胞及其细胞因子IL-17、IL-22进行相应的研究,旨在为肝脏疾病的诊疗提供新的方向和思路。
1 材料与方法
1.1 一般资料:84例乙型病毒性肝病患者来自2010年1月~2011年6月泗洪人民医院病人,其中,男52例,女32例;年龄26-78岁,平均年龄42.5岁。所有病例选择均符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会制定的《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准[3],并排除合并感染其他病毒性肝炎,排除心、脑、肾、肺等器官疾病及高血压、糖尿病等。健康对照组40名来自健康体检者的血清,其中男28例,女12例,年龄26~67(平均39.3)岁,年龄与HBV感染组相配,均无肝炎病毒感染,且无肝脏、肾脏功能损害。所有标本收集后均于-80℃保存备用。
1.2 检测方法:IL-17的检测采用单克隆抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),由全自动酶免分析仪测定结果,试剂盒分别由Sigma公司提供,严格按试剂说明书进行操作,由全自动酶免分析仪测定结果。血清IL-22的检测采用IL-22抗体(Santa Cruz,美国)包被于反应板微孔,于4℃过夜;用含10g/dl BSA的封闭液37℃封闭2h,然后在每孔中加入待检样本并于37℃孵育2h,经洗涤后,加入HRP标记的羊抗人IgG(Zymed Laboratories,美国)于37℃孵育1h,加人TMB显色液,采用酶联仪450nm波长进行比色分析,读取A值,并与标准曲线比较进而获取IL-22血清表达水平。血清ⅣC、LN及HA检测采用ELISA法,试剂盒由中科院上海细胞生物研究所提供。血清总胆红素(TBIL)和γ-GT水平通过常规自动生化分析仪测定。
1.3 统计学方法 采用SPSSI4.0软件进行统计学分析。计量资料用(±s)表示均数间的比较采用方差分析和t检验的方法,相关性采用Sp
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