第二节染色质.pptVIP

第二节 染色质 染色质的概念及化学组成 染色质的基本结构单位——核小体 染色质包装的结构模型 染色质和异染色质 一·染色质的概念及化学组成 概念 染色质DNA 染色质蛋白质 (二)染色质DNA 基因组（genome） DNA一级结构的多样性 DNA二级结构的多形性 (1)基因组 概念:在真核细胞中，每条未复制的染色体包装一条DNA分子，一个生物贮存在单倍染色体组中的总遗传信息 生物基因组中的遗传信息 : 编码序列 调控序列 (2)DNA一级结构的多样性 非重复DNA序列 中度重复DNA序列 高度重复DNA序列 中度重复DNA序列 短散在重复元件（short interspersed elements，SINEs） 长散在重复元件（long interspersed elements，LINEs） 高度重复DNA序列 卫星DNA（satellite DNA），重复单位长5～100bp ,主要分布在染色体着丝粒部位 小卫星DNA（minisatellite DNA）重复单位长12～100bp，重复3 000次之多，每个小卫星区重复序列的拷贝数是高度可变的 微卫星DNA（microsatellite DNA）重复单位序列最短，只有1～5bp，串联成簇长度50～100bp的微卫星序列 DNA构型的生物学意义 沟的特征在遗传信息表达过程中起关键作用;沟的宽窄及深浅也直接影响碱基对的暴露程度，从而影响调控蛋白对DNA信息的识别;在生理状态下，由于细胞内各种化学修饰的影响和结合蛋白的作用使3种构型的DNA处于一种动态转变之中;DNA双螺旋能进一步扭曲盘绕形成特定的高级结构，DNA二级结构的变化与高级结构的变化是相互关联的，这种变化在DNA复制与转录中具有重要的生物学意义 (三)染色质蛋白质 组蛋白（histone） 非组蛋白（nonhistone） 1.组蛋白 组蛋白是构成真核生物染色体的基本结构蛋白，富含带正电荷的Arg和Lys等碱性氨基酸，等电点一般在pH10.0以上，属碱性蛋白质，可以和酸性的DNA紧密结合，而且一般不要求特殊的核苷酸序列，用聚丙烯酰胺凝胶电泳可以将组蛋白区分为5种组分：H1、H2A、H2B、H3 和H4。 2.非组蛋白 非组蛋白主要是指染色体上与特异DNA序列相结合的蛋白质 ，又称序列特异性DNA结合蛋白 （sequence specific DNA binding proteins） 。 （1）非组蛋白的特性 ①非组蛋白具有多样性和异质性 ②对DNA具有识别特异性 ③具有多种功能 （2）序列特异DNA结合蛋白的不同结构模型 ①α 螺旋-转角-α 螺旋模式 ②锌指模式 ③亮氨酸拉链模式 ④螺旋-环-螺旋结构模式 ⑤HMG框结构模式 二·染色质的基本结构单位——核小体 主要实验证据 核小体结构要点 （一）主要实验证据 1. 用温和的方法裂解细胞核，将染色质铺展在电镜铜网上，通过电镜观察，未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝，经盐溶液处理后解聚的染色质呈现一系列核小体彼此连接的串珠状结构，念珠的直径为10nm 2.用非特异性微球菌核酸酶消化染色质，部分酶解片段分析结果 3.应用X射线衍射、中子散射和电镜三维重建技术 4. SV40微小染色体（minichromosome）分析 （二）核小体结构要点 1．每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体以及一个分子的组蛋白H1 2．组蛋白八聚体构成核小体的盘状核心结构 3．146bp的DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈。组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bp DNA，锁住核小体DNA的进出端，起稳定核小体的作用。 包括组蛋白H1和166bp DNA的核小体结构又称染色质小体（chromotosome） 三·染色质包装的结构模型 染色质包装的多级螺旋模型 染色体的骨架-放射环结构模型 （一）染色质包装的多级螺旋模型 ◆一级结构：核小体 ◆二级结构： 螺线管(solenoid) ◆三级结构：超螺线管(supersolenoid) ◆四级结构：染色单体（chromatid） （二）染色质的骨架-放射环结构模型 实验结果： 由非组蛋白构成的染色体骨架（chromsomal scaffold）和由骨架伸出的无数的DNA侧环。30nm的染色线折叠成环，沿染色体纵轴，由中央向四周伸出，构成放射环 理论描述： 首先是直径2nm的双螺旋DNA 与组蛋白八聚体构建成连续重复的