《生理科学实验作业范本》1C-朱榕生-48.docVIP

实验报告 课程名称： 生理科学实验 实验类型： 动物实验 实验项目名称： 肝功能对药物作用的影响 同组学生姓名： 颜辉 乐辰升 指导老师： 王梦令 实验48 肝功能对药物作用的影响 朱榕生 颜辉 乐辰升 （浙江大学医学院2011级临床医学专业1C班第1组，浙江，杭州，310058） zhurongsheng@zju.edu.cn [摘要] 目的 通过观察小鼠肝功能损伤对异丙酚(propofol)药效的影响，了解肝脏在药物代谢中的重要性。方法 制作肝损小鼠模型，腹腔注射propofol溶液，观察其翻正反射消失和恢复的时间，并与正常小鼠对照。结果 正常小鼠和肝损组小鼠在腹腔注射异丙酚100mg/kg后，进入翻正反射消失的时间分别为3.94±1.08min，3.47±0.68min，两者无显著差异（p0.05) ；翻正反射消失至恢复的时间分别为25.32±12.98min，56.33±8.31min，两者具有显著差异（p0.05)。正常小鼠处死解剖后肝脏色红，有韧性，表面光滑。肝损小鼠解剖后肝脏颜色较正常小鼠灰白，体积增大，表面有弥漫性细小颗粒。 结论 小鼠肝功能损伤使propofol的生物转化受到影响，延长了其体内作用时间。 [关键字] 小鼠；肝损模型；异丙酚；生物转化 Propofol是一种快速短效的全麻药，在体内主要经肝脏的生物转化消除。Propofol的脂溶性极高，血浆蛋白结合率96%-98%，由肾小球滤过较少，也易被肾小管再吸收，其主要消除方式由肝药酶代谢。因此，肝损伤极易使propofol的生物转化受阻[1]，从而使小鼠的麻醉时间延长。本实验通过观察小鼠翻正反射的消失与恢复时间来判断Propofol的作用时间，以了解肝脏在药物体内代谢方面的作用。 材料与方法 实验对象 小鼠 实验试剂 10g/L propofol溶液，四氯化碳 实验仪器 计时器 实验方法 肝损模型 实验前24h用10%四氯化碳0.2ml/10g皮下注射，损伤小鼠肝动能。 取体重相近的正常及肝功能已损伤小鼠各一只，称体重，以苦味酸溶液做好标记。并试其翻正反射是否存在（将小鼠仰卧试验台上，若能恢复正常体位，为反正反射存在，否则翻正反射消失）。 按100mg/kg剂量腹腔注射10g/L propofol溶液。 记录进入翻正反射消失的时间。 记录翻正反射消失到恢复的时间。 将小鼠处死，剖视肝脏观察形态改变，并注意肝脏形态改变与麻醉作用维持时间的关系。 结果 2.1 A组小鼠和B组小鼠在腹腔注射异丙酚100mg/kg后，进入翻正反射消失的时间分别为3.47±0.68min，3.94±1.08min，两者无显著差异（p0.05) ；翻正反射消失至恢复的时间分别为56.33±8.31min，25.32±12.98min，两者具有显著差异（p0.05)。见表1。 2.2 A组小鼠解剖后肝脏颜色较正常小鼠灰白，体积增大，表面有弥漫性细小颗粒。B组小鼠处死解剖后肝脏色红，有韧性，表面光滑。 表1.propofol诱导正常小鼠与肝功能受损小鼠麻醉维持时间的比较 组别 异丙酚(mg/kg) 动物数（只） 翻正反射消失的时间(min) 翻正反射消失至恢复时间(min) A组 100 10 3.47±0.68 56.33±8.31** B组 100 10 3.94±1.08 25.32±12.98 注：**:p0.01 vs B组 讨论 四氯化碳（carbon tetrachloride, CCl4）导致肝损伤的主要机制目前认为与其自身和自由基代谢产物有关。CCl4代谢产生的自由基进入机体后，在肝脏经细胞色素P450激活，生成三氯甲基自由基和三氯甲基过氧自由基，攻击肝脏细胞膜上的磷脂分子，使得细胞膜、内质网膜发生氯烷化和脂质过氧化，损伤细胞膜、细胞器；还能与膜脂质和蛋白质大分子进行共价结合，影响蛋白质代谢，并且破坏膜结构和功能的完整性，钙离子内流增加，影响细胞正常生理功能，最终导致肝细胞胞质中的可溶性酶渗出，细胞死亡[2]。从小鼠肝损模型的肝脏解剖结果可知，损伤的肝脏表面固缩，颗粒弥漫，细胞内肝药酶受到抑制或活性减弱。 药物在生物体内转化代谢需要肝脏肝药酶的作用。本实验通过翻正反射消失的持续时间来衡量Propofol在体内起效的时程。在体内，Propofol在肝药酶CYP2B6作用下会进行生物转化而失去效用[3]。实验结果显示正常组小鼠和肝损组小鼠进入翻正反射的时间无显著差异，说明腹腔注射propofol的起效时间在两组小鼠中大致相同；而肝损组小鼠从翻正反射消失至恢复的时间比正常