中药药理实验方法学.pptVIP

药理学实验基础知识 开课目的：培养科学思维方法，严肃的科学态度，提高分析问题解决问题的能力。掌握基本实验操作技能和实验方法，为今后科学研究打下基础。 要 求：工作服、仪器领取、卫生打扫、动物处理。 实验动物分类： 按种系分三种情况 A、按遗传学控制方法分为4类：近交系动物、突交系动物、F1杂种动物、封闭群动物。 B、未经遗传学控制的杂种动物。 C、按微生物学控制方法分5类：无菌动物、悉生动物、无特殊病原体动物、清洁动物、普通动物。 我国将实验动物分为四级： 一级动物：普通动物（CV）---普通自然环境中饲养繁殖的健康带菌动物。（教学和一般实验用） 二级动物：清洁动物（CL）---用于一般动物实验，除一级标准外，还需要不带有动物传染病病原体。 三级动物：无特殊病原体动物（SPF），在CL基础上还需不带有干扰实验的微生物。 按纯系动物的要求进行繁殖，在隔离器内或层流室内饲养，只有一些不致病的细菌丛，没有致病的病原体。 四级动物：无菌动物（GF）和悉生动物（GN）。 GF：全封闭无菌条件下饲养的纯系动物，体内不带任何微生物和寄生虫（包括绝大部分病毒）； GN：要求在无菌动物体内植入一种或数种已知的微生物。 三、四级动物要求高，价格贵，适用于特殊目的和要求的实验。 实验动物的选择： a.选对与人的机能、代谢、结构、疾病特点和机能反应相近似的实验动物。药物的反应与人的反应相似的动物。 b.选用遗传背景明确，模型指标显著且稳定，解剖、生理特点符合实验目的的实验动物。 ＳＤ大鼠：远交系大鼠， 对呼吸道疾病抵抗力强，对性激素刺激性高，多用于生理、营养、安全性试验。 小鼠：常用于药物筛选、急性毒性实验。价格便宜，繁殖周期短，易得。（18~22g） 大白鼠：常用于抗关节炎实验、利胆实验、子宫实验、长期毒性实验（150~200g） 豚鼠：研究平喘药和抗组胺药常用，对组胺特别敏感。毒理学中过敏实验（300~500g） 家兔：常用于观察药物对呼吸、心脏、血管、肠肌运动的影响，热源检查、解热实验；雌兔用于避孕药研究和子宫实验。（1.5~2.5Kg） 犬：常用于慢性实验如高血压、胃瘘、肠瘘、冠脉流量，还有长期毒性实验。 其他动物：鸽子、蛙类、果蝇、蚕、猴、猫、鸭等。 分组方法： 分层分组法---按性别、体重、测定指标（如基础体温、痛阈）先分层，再分组； 随机数字表法：按随机数字表来分组。 编号：标记常用苦味酸（3%~5%）、中性品红（0。5%）、硝酸银（2%）；方法见书，较大的动物如犬、猫等，可用号码牌挂在动物颈部或将特制的铝牌固定在耳壳上。 取血方法： 小鼠、大鼠---①断尾、②眼底（内眦球后静脉丛，小鼠可取0.2~0.3cc,大鼠可取0.5~1cc)、③断头、颈动脉取血。 兔--①耳缘静脉，②心脏，③股动脉 犬--①后肢外侧小隐静脉，②前肢背侧皮下头静脉，③耳缘静脉 豚鼠--①耳缘切割，②心脏穿刺。 常用抗凝剂 ①草酸钾 饱和液2滴于试管中，80度以下烘箱烘干，可抗凝3~5ml血液。若测定钾、钙含量的不用。 ②肝素 1%肝素0.1ml于试管中，80~100度烤干，可抗凝5~10ml血液 ③枸橼酸钠 3.8%枸橼酸钠1份，可抗凝9份血液。 血压实验用5~7%的枸橼酸钠抗凝。 实验报告或论文的书写 实验报告格式： 题目、目的、材料、方法、结果（表或图）、讨论、结论。 论文书写格式 题目、文摘、关键词、序、实验材料、方法、结果（表或图）、讨论（含结论）。参考文献 常用动物的捉拿和给药方法 捉拿 小鼠、大鼠、豚鼠的捉拿方法基本一致。家兔抓背部皮肤，另一只手托起臀部。狗用狗头夹夹住颈部后再抓。 给药： 途径--口服或灌胃、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、静脉注射。 静脉注射：家兔（耳缘静脉）、狗（后肢小隐静脉）、豚鼠（后脚掌外侧的静脉或颈外静脉） 给药剂量： 根据单位体重给药。 处死和处理方法 小鼠、大鼠、豚鼠：颈椎脱位法处死。 兔、狗、猫：静脉注射空气（10~30ml）致死。 实验完毕后，动物按要求处死，送到指定地点焚烧。没有焚烧条件的，用袋子装好，送至指定垃圾站。 影响中药药理作用的因素 三大因素：药物因素、机体因