神经退行性疾病的秀丽隐杆线虫模型研究进度.docVIP

神经退行性疾病的秀丽隐杆线虫模型研究进度 　　随着人口老龄化加剧，神经退行性疾病的发病率在近20年内上升了约20倍。然而迄今为止，神经科学领域中的诸多问题仍未被解决，如神经退行性疾病的具体发病机制尚不明确，治疗方法仅限于控制病情而无法根治;复杂的心理学和行为学因素参与了神经元和神经网络的调节，遗传和环境等因素对其影响尚不可知;相关的治疗药物也层出不穷。因此建立适合的实验动物模型、筛选出高效的药物是当务之急。 　　由于高等动物实验模型的神经系统结构和功能存在一定的复杂性，在研究过程中会出现诸多干扰因素。秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans)以其结构简单、生命周期短、易于培养以及与42%的人类疾病基因存在相关性等独特优势，已成为研究神经退行性疾病机制的良好在体模型，因此将简单的模式生物秀丽隐杆线虫作为神经系统疾病研究的切入点，展开深入研究，对理解神经退行性疾病发生发展规律具有重要意义，现就相关研究综述如下。 　　秀丽隐杆线虫及其神经系统介绍 　　秀丽隐杆线虫属于线形动物门线虫纲动物，其为低等无脊椎动物。秀丽隐杆线虫通常生活在土壤中，易人工养殖，以大肠杆菌OP50为食，无寄生性。秀丽隐杆线虫有雌雄同体和雄性两种性别，在自然界中主要以雌雄同体为主。野生型秀丽隐杆线虫株系N2在20℃培养温度下可发生自体繁殖，这种自我繁殖的能力有利于得到具有同一基因型的纯合体，一生产卵可达300个，生长周期短为3d左右，经历幼虫期(L1、L2、L3、L4)和成虫期，生命周期长约20d左右，逆环境条件下(如高温、拥挤或饥饿)可进入dauer期(抵抗逆环境的状态)。成虫长度约1-2mm，通体透明，其能像细菌一样在-80℃冰箱长期保存，它有味觉和嗅觉，并能感受光、接触、温度、化学物质、离子等刺激。线虫的神经信号传导系统具有高度的保守性，并且线虫中存在超过42%的人类疾病相关基因。 　　秀丽隐杆线虫有959个体细胞，其中包括302个神经元，56个胶质细胞。根据其形态差异，可将302个神经元分为118种类型;根据其功能差异，又可将其分为感觉神经元、中间神经元、运动神经元。秀丽隐杆线虫包含多种与人类相关的神经递质，如乙酰胆碱、多巴胺、5-羟色胺、谷氨酸、gamma;-氨基丁酸和神经肽等，且其在神经元中的合成、储存和代谢等过程与哺乳动物也具有高度相似性。秀丽隐杆线虫所具有的大多数离子通道基因与哺乳动物也具有同源性。秀丽隐杆线虫的神经退行性疾病模型 　　1. 阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease，AD)秀丽隐杆线虫 　　模型 AD是现今人类第一大神经退行性疾病，其为一种渐进性神经退行性疾病。AD的临床表现为进行性记忆功能受损、认知功能障碍及行为状况改变、语言功能受损，最终导致生活不能自理直至死亡，其病理特征主要表现为神经细胞外由beta;淀粉样蛋白(Abeta;)异常沉积形成淀粉样老年斑(amyloid plaques)和神经细胞内tau蛋白自聚集出现神经纤维缠结(neuro fibrillarytangles，NFTs)。目前，已有多种模式生物被应用于AD的研究，秀丽隐杆线虫也位列其中。现阶段已被建立的秀丽隐杆线虫AD模型多为转基因模型：Abeta;模型和tau模型。 　　1.1 Abeta;模型 Abeta;是APP经beta;分泌物和gamma;分泌物剪切后形成的，首先被beta;分泌酶在671位点水解，再由gamma;-分泌酶对711-713位点进行水解，则产生由39-43个氨基酸残基构成的Abeta;，并在AD脑内出现异常释放和沉积，形成老年斑(SP)。随着研究者们对研究的不断深入，越来越多的证据表明Abeta;在AD的发生和发展过程中起到主导作用。由于秀丽隐杆线虫中不存在beta;-分泌物的类似基因，转入人的APP基因后不能自行产生Abeta;，故目前建立的模型主要是转Abeta;基因模型。早在1995年，Link C D等最先建立了转Abeta;1-42基因的模型CL2006，该模型在培养2d左右出现细胞内Abeta;沉积以及进行性麻痹的表型，但并没有直接的AD的病理特征出现。因此，研究者们又提取AD患者死后脑组织中的RNA，并对其进行RT-PCR研究，验证在秀丽隐杆线虫中所筛选到的人同源基因的表达情况，发现Abeta;晶状体蛋白基因(CRYAB)和肿瘤坏死因子诱导蛋白(TNFAIPI)基因在AD病人中的表达确实提高。与此同时，Boyd-Kimball D等和WU Y等在对Abeta;1-42进行研究时，发现其在转基因线虫的神经元和突触小体中发生了蛋白质氧化和脂质过氧化反应，并从中发现了16种氧化形式的蛋白质，进一步证明蛋白质氧化参与Abeta;诱发的神经退行性病变的过程。虽然在神经