GhWRKY3.doc

GhWRKY3, a novel cotton (Gossypium hirsutum L.) WRKY gene, is involved in diverse stress responses 摘要 WRKY蛋白质在植物的防御反应中发挥重要作用。在本研究中，从棉花中分离（陆地棉）的一种新的WRKY基因，提名为GhWRKY3，。 GhWRKY3的全长cDNA为1705 bp，编码由507个含有两个典型WRKY结构域和两个锌指基序的氨基酸组成的蛋白质。氨基酸序列比对显示，GhWRKY3与其他高等植物WRKY蛋白质具有很高同一性的程度。亚细胞定位分析表明，GhWRKY3定位于细胞核中。对GhWRKY3 5 侧翼区分析显示一组普遍认为的顺式作用元件。表达分析的结果表明，GhWRKY3是在根，茎和叶中进行组成性表达。半定量RT-PCR结果显示GhWRKY3被上调是通过各种植物激素应用的，包括水杨酸（SA），茉莉酸甲酯（茉莉酸），脱落酸（ABA），赤霉素（气）和乙烯（ET）。此外，GhWRKY3的合成分别感染水稻纹枯病，炭疽病棉蚜和棉花枯萎病菌后得到增强。另外，GhWRKY3可通过伤害处理被诱导，但不受细胞分裂素（6-苄氨基嘌呤，6-BA），生长素类似物，干旱，盐和冷（4℃）诱导。这些数据表明，GhWRKY3可能在植物的防御反应中起重要作用，并实现其在植物发育的关键作用。 简介 在整个生命周期中，植物遇到各种生物和非生物胁迫。在进化中，植物已经产生了一系列复杂的响应机制，并具有通过多种信号通路感知和响应各种外部信号的能力。植物激素是多种信号通路的重要组成部分，它们通过协同或拮抗作用共同调节植物生长，发育和防御反应[ 1 ]。 此外，转录调控机制在植物发育和环境刺激的反应中也发挥了作用。这些复杂的转录调控过程主要是由具有激活或抑制的相关基因的表达的能力的转录因子实现[ 2，3 ]。WRKY蛋白是这些转录因子成员之一，它代表一个锌指转录因子的大家族。所有WRKY蛋白含有一个或两个保守结构域，约60个氨基酸和DNA结合活性的特定的DNA序列（C / T）TGAC（T / C）（命名为W盒）。在WRKY结构域，WRKYGQK的保守序列存在于N-末端和一个锌指基序（C-X4-5-C-X22-23-H-X1-H或C-X7-C-X23-H-X1-C）位于C-末端[4，5]。 基于WRKY域的数量和锌指基序的类型，WRKY蛋白被分为三组。I组的成员有两个WRKY结构域。组II和III有一个WRKY域和他们已经根据锌指基序[ 4 ]类型区分。此前，WRKY蛋白被认为是受限于植物[ 5 ]，越来越多的WRKY蛋白是从不同的植物物种的鉴定，分别有74种拟南芥和109水稻[ 6，7 ]。然而，最近WRKY样蛋白是从原生生物贾第鞭毛虫和粘菌盘基网柄菌分离的[8,9]。 各种WRKY基因的功能用遗传和分子的方法已经被阐明。日益增长的数据表明，WRKY基因表达水平在病原体感染或激素处理后迅速被诱导。在拟南芥中，72个中的49个WRKY基因在丁香假单胞菌感染或SA处理[ 10 ]后有差异调节。在油菜（Brassica napus L.），13 bnwrky基因的转录丰度在病原体感染后发生变化，并且16个中的13个 bnwrky基因响应于一个或多个激素，包括ABA，JA，SA和6-BA，等[ 11 ]。一些WRKY基因的作用于多个信号通路之间的串扰。例如，AtWRKY70作为SA依赖性防御反应的正调节和JA-依赖的防御反应的负调控[ 12，13 ]。此外，AtWRKY70也影响植物衰老[ 14 ]。SA和MeJA诱导atwrky62表达。atwrky62突变体和atwrky62过表达植株两者的遗传分析表明，wrky62下调JA响应LOX2和VSP2 基因[ 15 ]。 此外，WRKY蛋白参与了多种非生物的防御反应和发育过程，如寒冷和干旱胁迫，伤害和次生代谢产物的生物合成。 棉花（Gossypium hirsutum L.）是一种重要的经济作物。虽然从棉花中鉴定了许多基因，如ghcdh ，ghpod [ 20 ]，ghaox1 [ 21 ]，ghrdrp [ 22 ]，和ghppr1-5 [ 23 ]，但有关于WRKY转录因子是否参与介导致病菌和棉花信号激素的反应没有报告。在本研究中，我们从棉花中分离出了一种新的WRKY基因，ghwrky3，编码一个假定的I组WRKY蛋白。ghwrky3组成型表达在根，茎和叶。SA，ABA，MeJA，ET，GA3和H2O2能使ghwrky3的转录上调。此外，ghwrky3的表达也受伤害和三种真菌病原体包括立枯丝核菌，炭疽菌和枯萎菌感染诱导，但不受6-BA，NAA，干旱，盐，和冷（4