PCR技术原理简介2013幻灯片.pptVIP

* * * * * 2013/3/21 PCR是由美国科学家Kary B. Mullis 提出的一种体外简化条件下模拟DNA体内复制的DNA快速扩增的方法，获得1993年诺贝尔化学奖。 目录 基本原理 1 2 PCR反应体系 3 PCR的应用 4 实验流程 基本原理 聚合酶链反应（ polymerase chain reaction ，PCR ）：简称PCR技术，是一种体外扩增特异性DNA片段的技术，其基本工作原理是以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，通过变性-复性-延伸的循环操作，在体外迅速将DNA模板大量扩增。 一、基本原理 变性(denaturation):通过加热使DNA双螺旋氢键断裂，双链解离成单链DNA 模板 模板 基本原理 退火（annealing）:当温度降低时由于模板分子结构较引物复杂得多，而且反应体系中引物DNA量大大多于模板DNA，使引物和其互补的模板在局部形成杂交链，而模板DNA双链之间互补的机会较少 Primer 1 Primer 2 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ 基本原理 延伸(extension):在DNA聚合酶和4种脱氧核糖核酸底物及Mg2+存在的条件下，5’ 3’的聚合酶催化以引物为起始点的