第六章第三节_其他致病菌的检验3幻灯片.pptVIP

三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 2、 样品的处理: 以无菌操作采取样品25ml(g)置于灭菌均质器中,加入225ml的EB和LB增菌液,充分搅拌均匀.如不能及时检验,可保存在4℃冰箱中. 3 、 增菌培养 EB增菌液放入(30+-1)℃温箱中培养48h-72d.LB1增菌液放入(30+-1)℃温箱中培养24h,取出0.1ml加入10ml的LB2增菌液中2次增菌. 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 4、分离培养 将EB增菌液和LB2增菌液分别画线接种于MMA选择性培养基琼脂平板上,置(30+-1)℃培养48h小时,挑选可疑菌落,用白炽灯45度角斜光照射平板,该菌的菌落为灰蓝或兰色小圆形菌落. 选择MMA平板上5个以上的可疑菌落接种三糖铁琼脂和SIM动力培养基,培养于(25+-1) ℃,观察是否有动力,且伞状或月牙状生长.一般观察,阳性者作下一步实验. 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 三糖铁（TSI）琼脂试验 SIM动力试验 接种三糖铁琼脂，35℃培养5天。 斜面和底层产酸，不产生硫化氢者为可疑菌落（发酵葡萄糖和蔗糖） 三、单核细胞增生李斯特氏菌检验 5 、纯培养 将上述有动力、伞状，并在三糖铁琼脂培养基上层下层产酸而不产硫化氢的可疑菌落接种于胰酪胨大豆琼脂培养基（YSA-YE）上，做纯培养，供做证实试验鉴定用