蛋白质的特性探究题库.pptx

蛋白质的微生物活性 组员： 王禾 张夏影 田萌 马玉洁 实验思路 蛋白质的获取 菌种获取 微生物培养 定性定量检测 抑菌性 蛋白质的特征 试验方案计划 材料来源 蛋白质的来源；菌种 微生物的培养 无菌操作 微量液体稀释抑菌技术 预实验 定菌种浓度及蛋白质稀释梯度 材料来源及基本思路 理想：蛋白质来源第五组实验结果所得的鸟卵蛋白 或是：给定的蛋白粉（未知名称）稀释测定 抑菌性 蛋白质 质量分数m 梯度稀释 菌种 共培养 根据蛋白质液体的抑菌技术测定 及标准曲线绘制，对蛋白质特征分析 微生物的培养 参考《微生物实验手册》 培养基选取牛肉膏蛋白胨或肉汤 配方：牛肉膏5.0g、蛋白胨10.0g、NaC1?5.0g、 琼脂20.0g、 无菌水1000?mL、pH7.0 无菌操作 无菌操作（注意事项） 实验器具及玻璃器皿等灭菌 实验过程中在超净工作台下的注意事项 操作人员自身的穿戴及操作，控制无菌 火焰消毒格外注意 1 2 3 4 试验方法 方案一：微量肉汤稀释法 方案二：琼脂糖稀释法 琼脂稀释法是将不同剂量的抗菌蛋白，加入融化并冷至50℃左右的定量MH琼脂中，制成含不同递减浓度抗菌药物的平板，接种受试菌，孵育后观察细菌生长情况，以抑制细菌生长的琼脂平板所含最低药物浓度为MIC。 本法优点是可在一个平板上同时作多株菌MIC测定，结果可靠，易发现污染菌缺点是制备含药琼脂平板费时费力。 参考：查阅最新进展的相关文献 /view/97612dde6f1aff00bed51e7d.html 方案一实验步骤 第一步 第二步 第三步 第四步 微量肉汤稀释法 ? 无菌操作，将倍比稀释后不同浓度的蛋白质溶液分别加到灭菌的96板中，第1至第11孔加药液，每孔10μl，第12孔不加药作为生长对照，冰冻干燥后密封， -20℃以下保存备用 将用生长法或直接菌悬液法制备的浓度相当于0.5麦氏比浊标准的菌悬液，经培养基1∶1000稀释后，向每孔中加100μl稀释液，密封后置35℃普通空气孵箱中，孵育时间待定。此时，第1孔至第11孔药物浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml。 以在小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度MIC。当阳性对照孔（即不含抗生素） 内细菌明显生长试验才有意义。当在微量肉汤稀释法出现单一的跳孔时，应记录抑制细菌生长的最高药物浓度。如出现多处跳孔，则不应报告结果，需重复试验。 预实验 单击此处添加标题 您的标题 您的内容打在这里，或者通过复制您的文本后，在此框中选择粘贴，并选择只保留文字。 您的小标题 您的小标题 您的小标题 您的内容打在这里，或者通过复制您的文本后，在此框中选择粘贴，并选择只保留文字。 您的内容打在这里，或者通过复制您的文本后，在此框中选择粘贴，并选择只保留文字。 您的标题请写在这里 单击此处录入页面标题 点击此处输入标题内容 点击此处输入文字 点击此处输入文字 点击此处输入文字 点击此处输入文字 Bread PPT 问题探究 1 2 3 4 控制蛋白质浓度不同还是菌液浓度不同 结果的验证 怎么用预实验确定稀释梯度