实验三细胞形态多样性及细胞计数一.实验原理应用显微镜.pptVIP

实验三 细胞形态多样性及细胞计数 一. 实验原理 应用显微镜的成像原理，并借助血细胞计数板，计算单位体积的细胞或微小生物的数量。 二.试剂与器械 器材 :光学显微镜、血细胞计数板。 三．实验步骤 取血细胞计数板，加盖玻片盖住两边的小槽。 充液：用小滴管将一小滴稀释血液滴在盖玻片边缘的玻片上，使稀释血液借毛细管现象自动渗透入计数室中。如滴入过多，溢出并流入两侧槽内，使盖玻片浮起，体积改变，会影响计数结果，需用滤纸把多余的溶液吸出，以槽内没有溶液为宜。如滴入溶液过少，经多次充液，易产生气泡，应洗净计数室，干燥后重做。 计数：充液后静止1-2分钟，待红细胞下沉后，方可进行计数。计数四角及中央共5个中方格内的20个小方格中所有红细胞数，计数时为了防止重复和遗漏，应按一定的顺序，先自左向右数到最后一格，下一行格子则自右向左，再下一行又自左向右，即呈S形计数。对于分布在刻线上的红细胞，依照“数上不数下，数左不数右“的原则进行计数。计数时，如发现各中方格的红细胞数目相差20个以上，表示血细胞分布不均匀，必须重新计数。 4. 求出细胞分布平均数= d0 + d1+……+d10 / 20 细胞密度 =细胞分布平均数×稀释倍数×4000/mm3 四. 注意事项 防止液体滴入过多，否则溢出并流入两侧槽内，会使盖玻片浮起，体积改变，会影响计数结果。