实验二、粪便中球虫卵囊的计数、分离和孢子化培养技术.docVIP

实验二、粪便中球虫卵囊的计数、分离和孢子化培养技术 （ounting, isolation and sporulation technology for coccidial oocysts in feces）河南科技大学动物科技学院闫文朝博士/yiqibank_Producthtml 【目的要求】 认识动物常见重要球虫卵囊的形态特征；掌握粪便中球虫卵囊的计数、分离和孢子化培养基本操作方法。这些操作是实验室开展球虫研究最常用的实验技术。 【基本原理】 卵囊通常存在于宿主粪便中，从粪便中分离球虫卵囊的方法有饱和食盐溶液漂浮法、饱和蔗糖溶液漂浮法和饱和硫酸镁溶液漂浮法，其中最常用的方法为饱和食盐溶液漂浮法。其原理是悬浮溶液如饱和食盐溶液密度高于卵囊密度，而低于粪便中大多数杂质，经离心或静置沉淀后，大部分杂质沉淀在容器底部，卵囊漂浮在悬浮溶液的表面，然后收集表层漂浮物；由于卵囊比重大于水的比重，所以表层漂浮物用自来水稀释离心后，卵囊沉淀富集于离心管底部即可得到大量球虫卵囊。 计算球虫感染强度即每克粪便中卵囊数量（oocysts per gram, OPG）和保存卵囊悬液中卵囊数量通常用麦克马斯特法(McMaster’s method)和血细胞计数板计数法，应用最广泛的是麦克马斯特法。麦克马斯特计数法的原理是用饱和食盐溶液作为悬浮溶液，把卵囊与比重较大杂质分开，使卵囊