岛津GPC基础知识及注意事项.pptVIP

* RQF的制约因素 RQF 仅适用于单链聚合物 如果聚合物有支链结构, MW的计算就有误 * 普适校正法 用一种高聚物标样做校正曲线，常用聚苯乙烯 样品结构可以与标样不一样，并且可以有支链 样品及标样在流动相溶剂中的K和α值必须己知 可以用粘度法来测定K和α的值 * 普适校正法公式 GPC反映的是淋洗体积与高聚物流体力学体积间的关系。根据Einstein粘度关系： [η]为特性粘度；v′表示聚合物链等效的流体力学体积；N为阿佛加德罗常数；M为聚合物分子量。 根据上式可用[η]M表示流体力学体积。 * 普适校正法公式 当样品与标样有相同的淋洗体积时，下式成立： ?? 式中下标1为标样参数，2为样品参数。 将Mark-Houwink方程([η]=KMα)代入，即得到： 从而得出： ??? * 渐进试差法(宽分布标样校正法) 不需要窄分布标样，只需要宽分布标样 标样和样品为同一种物质 标样数量最少可以只有1个 标样的分子量Mw和Mn必须已知 标样校正曲线呈线性 * 渐进试差法(宽分布标样校正法) 在一定条件下，有： (1) 将标样色谱峰分成若干个切片，则： (2) 根据定义，有： (3) (4) 将公式(2)代入公式(3)和(4)，则： (5) (6) 标样的Mw和Mn已知，将Hi,Vi代入，软件自动算出A,B值。 * GPC分析大致步骤 根据样品的特点选择合适的GPC柱子和标样，并且确定采用的GPC校正方法 配制标样和样品，用LCsolution进样得到色谱图 用LCsolution GPC生成校正曲线并计算样品平均分子量，制作报告 * GPC系统安装注意事项 安装色谱柱 柱子串联时排阻极限大的接前面 管路选择 使用全不锈钢流路，不能有PEEK材质的部件存在 溶剂更换 水和氯仿不互溶 最高压力设置 柱子串联时将最高压力设为所有柱子允许承受的最高压力只和 柱子使用注意事项 一定要严格按照说明书使用色谱柱(部分柱子不能用甲醇冲洗) * 安装色谱柱 通常而言，分析结果与色谱柱组安装的顺序无关。尽管如此，为了提高分离度和延长色谱柱寿命，应按孔径由大到小顺序安装色谱柱，即排阻极限大的接前面，排阻极限小的接后面。 原因在于，孔径越大，越粗糙，越能承受外来物质的积累污染。而且，样品中高分子量的物质对样品的粘度影响最大。如果大分子先被分离，粘度下降更快，对色谱柱的压力降低。 * GPC分析注意事项 如何配制标样和样品 系统平衡 柱子冲洗及保存 校正曲线有效时间 亲水性聚合物分析 积分参数的设置(基线及切片数) * GPC标样配制 由于凝胶色谱中浓度检测通常使用示差折光检测器，其灵敏度不太高，所以试样的浓度不能配置得太稀。但另一方面色谱柱的负荷量是有限的，浓度太大易发生“超载”现象。 一般情况下，进样浓度按分子质量大小的不同在0.05~0.5%（质量分数）范围内配置。分子质量越大，溶液浓度越低。 标样配制应该严格按照标样说明书进行。通常室温静置12小时以上，然后轻轻混匀。绝对不能超声或者剧烈振荡来加速溶解。不要在配制过程中带入污染物。 溶液进样前应先经过过滤，以防止固体颗粒进入色谱柱内，引起柱内堵塞，损坏色谱柱。 * GPC标样配制 一种分子量的标样进样一次得到标样色谱图，这样的结果是最理想的。通常，为节约时间，可以将分子量相差较大(峰不会重合)的两种标样配制在一个瓶中，然后进样，可以节约一半的标样分析时间。 如8个不同分子量的标样可以按右表编成4组分别进样。 组 分子量 1 853000 48000 2 380000 23700 3 186000 12200 4 100000 5800 * 进样浓度范围及体积 分子量范围 样品浓度 低于5,000 1.0% 5,000～25,000 0.5% 25,000～200,000 0.25% 200,000～2,000,000 0.1% 高于2,000,000 0.05% 进样体积 50-100uL之间(浓度在0.05%-0.5%之间) * GPC系统平衡 安装色谱柱之前，用两通管连接管路，用流动相替换系统后换上GPC柱子。(注意溶剂互溶情况) RID平衡操作 分析开始前，用流动相冲洗检测器流路。 流动相流速1ml/min，切换到R Flow，使流动相通过检测池的样品池和参比池，冲洗20min左右。 然后切换R Flow 流路数次，将气泡赶出检测池。 关闭R Flow，等待基线平稳。 当Balance 值高于50，进行Balance 调整。 色谱柱平衡 等溶剂峰出峰后在经过约一次分