第10章DNA的生物合成.ppt

第10章 DNA的生物合成 DNA Biosynthesis ( Replication ) 复制(replication) 是指遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。 本章主要内容： 复制的基本规律 DNA复制的酶学和拓扑学变化 复制的过程 逆转录和其他复制方式 DNA损伤（突变）与修复 复制的基本规律 Basic Rules of DNA Replication 第 一 节 复制的方式 ——半保留复制(semi-conservative replication) 双向复制(bidirectional replication) 半不连续复制(semi-discontinuous replication) 复制的基本规律 一、半保留复制是DNA复制的基本特征 DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 半保留复制的概念: A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C C C A C T G G G G T G A C C A G G T A C T G T C C A T G A C T C C A T G A C A G G T A C T G A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C + 母链DNA 复制过程中形成的复制叉 子代DNA 子链继承母链遗传信息的几种可能方式: 全保留式 半保留式 混合式 密度梯度实验: ——实验结果支持半保留复制的设想。 第一代 第二代 梯度离心结果 按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。 半保留复制的意义: 遗传的保守性，是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的。 原核生物复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 二、DNA复制从起始点向两个方向延伸形成双向复制 A. 环状双链DNA及复制起始点 B. 复制中的两个复制叉 C. 复制接近终止点(termination, ter) 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子的复制。习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子(replicon) 。复制子是独立完成复制的功能单位。 三、DNA一股子链复制的方向与解链方向相反导致半不连续复制 领头链 (leading strand) 随从链 (lagging strand) 顺着解链方向生成的子链，复制是连续进行的，这股链称为领头链(leading strand) 。 另一股链因为复制的方向与解链方向相反，不能顺着解链方向连续延长，这股不连续复制的链称为随从链(lagging strand) 。复制中的不连续片段称为岡崎片段(okazaki fragment)。 领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。 DNA复制的酶学和拓扑学变化 第 二 节 The Enzymology and Topology of DNA Replication 参与DNA复制的物质: 底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP； 聚合酶(polymerase): 依赖DNA的DNA聚合酶，简写为 DNA-pol； 模板(template): 解开成单链的DNA母链； 引物(primer): 提供3?-OH末端使dNTP可以依次聚合； 其他的酶和蛋白质因子。 一、核苷酸和核苷酸之间生成磷酸二酯键是复制的基本化学反应 聚合反应的特点: DNA 新链生成需引物和模板； 新链的延长只可沿5? → 3?方向进行。 二、DNA聚合酶催化核苷酸之间聚合 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称：DNA-pol 活性： 1. 5??3? 的聚合活性 2. 核酸外切酶活性 3? ? 5?外切酶活性: 5? ? 3?外切酶活性: ? 能切除突变的 DNA片段。 能辨认错配的碱基对，并将其水解。 核酸外切酶活性: （一）原核生物的DNA聚合酶分为三型 DNA-pol Ⅰ DNA-p