第七章2DNA的重组与转座.pptVIP

Integration The F plasmid can integrate by recombination into the host chromosome and then transfer part of the host genome Transformation Bacteria can take up naked DNA from their environment. It can integrate into the chromosome by homologous recombination. Transduction Some viruses can integrate into the host genome. Inaccurate excision removes a piece of host DNA which can be packaged and transferred to another cell 7.2.2 细菌的特异位点重组 ◆鼠伤寒沙门氏菌（S.typhimrium）的相转变： 鞭毛抗原有两种（H1和H2） H1和H2是由两个非等位基因编码， 两者相距较远。 相转变（phase variation）： 单个细菌只有一种鞭毛抗原，但同一菌落 既可以表现为H1型，也可以表现为H2型。 在细菌的分裂中有1/1000的概率会出现由 一相转变为另一相 7.3.6 真核生物的转座因子 自然界第一个被发现的转座成分就是玉米中的“控制成分”。Barbara McClintock从1942年到冷泉港实验室后就开始进行玉米控制成分的研究，1951年发表了她关于玉米控制成分的论文。她的开创性的工作打破了孟德尔关于基因在各个独立的染色体上固定排列 的僵化概念。此后，人们又陆续发现 了许多真核生物中的可转移成分，范 围从低等真核生物（酵母）一直到最 高等的真核生物（人类）。因此，人 们认识到，真核生物基因组的流动性 比原核生物更大。 1951年美国遗传学家芭芭拉·麦克林托克根据玉米染色体的长期观察研究，提出了转座的新概念，也就是说基因可以在染色体上移动。 真核生物的转座成分根据转座机制目前分为两类： 1) 转座机制与细菌的转座子类似 遗传信息： DNA→DNA ?玉米的Ac-Ds元件、果蝇的P元件和FB元件等 2) 转作机制类似逆转录病毒 遗传信息： DNA→RNA→DNA ?如：逆转录病毒、果蝇的copia元件、酵母的Ty元件等 2. RecA蛋白与Holliday中间体的形成 RecA有两个主要的功能：诱发SOS反应和促进DNA单链的同化。RecA蛋白能特异地识别单链DNA，并能将之与同源双螺旋中的互补顺序“退火”，同时将另一条链排挤出去，形成所谓D环（D－LOOP）。 RecA催化单链和双链DNA之间的反应分为三个时期： （1）缓慢的前联会期。在此期RecA聚集在单链DNA上； （2）快的配对反应。在单链DNA和双链中其互补链之间产生异源双链连接。 （3）慢的取代反应。取代双链中的一条链，产生一个长的异源双链区。 RecA 入侵单链 被置换连 3. Ruv蛋白与Holliday中间体的拆分 需要 E.coli 中三个基因RuvA,RuvB 和 RuvC 的产物 a、RuvA 识别 Holliday 结构的连接点 b、RuvB 为分枝迁移提供动力（ATPase 10～20bp/s） c、RuvC 核酸内切酶专一性识别 Holliday 结构的连接点，体外切断连接点以拆分重组体 7.2 特异位点重组 特异位点重组发生在两个DNA分子的特异位点上。不依赖于DNA顺序的同源性（虽然亦可有很短的同源序列），而依赖于能与某些酶相结合的DNA序列的存在。由于DNA整合方式的特异性和高度保守性, 因此位点特异性重组又称保守重组(conservative recombination)。这些特异的酶能催化DNA链的断裂和重新连接，它们能发动位点特异性重组作用。这种重组不需要RecA蛋白的参与。两个DNA分子并不交换对等的部分,有时是一个DNA分子整合到另一个DNA分子中。 特异位点重组的结果依赖于重组位点的位置和方向 重组位点以白箭头表示。A、重组位点反方向位于同一DNA分子，重组结果发生倒位。B、重组位点同方向位于同一DNA分子，重组发生切除；位于不同分子，重组发生整合。 7.2.1 λ噬菌体DNA的整合与切除 λ噬菌体有两种存在型式：裂解状态和溶源状态。为了进入