亲和层析.ppt

亲 和 层 析 Affinity Chromatography 一、概述 亲和层析：是利用生物大分子之间有专一的亲和力而达到分离纯化的层析方法 优点：1.纯化过程简单、迅速 2.分离效率高 3.实验条件温和 缺点：1.针对某一分离对象就需要制备专一的 吸附剂和建立相应的实验条件 2.配基的选择及其与基质的共价结合需 要烦琐的操作步骤 二、基本原理 生物专一吸附 (bioselective adsorption ) 1.具有专一性亲和力的生物分子对： 酶—底物（包括酶的竞争性抑制剂和辅 酶因子） 特异性抗原—抗体 激素—受体 DNA—互补的DNA或RNA 凝集素和糖蛋白 2.基本过程： ?固相化 ? (Immobilise) ? 配基Ligand:亲和层析中能被某一生物大分子识别和可逆结合的生物专一性物质。 基质Matrix(载体):亲和层析中与配基共价结合,使其固相化