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- 2017-02-24 发布于河南
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(二)目的基因与运载体的结合——DNA连接酶 思考题:目的基因与运载体结合的结果可能有几种情况? ?? 有三种情况:目的基因与目的基因结合,质粒与质粒结合,目的基因与质粒结合。 (三)将重组质粒(DNA分子)导入受体(宿主)细胞——一般要用Cacl2处理受体细胞,以增大细胞壁的通透性。 常用的受体细胞有:大肠杆菌、土壤农杆菌、 酵母菌、枯草杆菌、动植物细胞 等。 (四)目的基因的检测和表达 原理:利用运载体的某些标记性基因 例如: 大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当它重组并导入受体细胞后,就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。 * 基因工程 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 剪切 拼接 导入 表达 人类需要的基因产物 一、基因工程的概念 二、基因操作的工具 苏云金芽孢杆菌(有抗虫特性) 抗虫基因 普通棉花(无抗虫特性) 棉花细胞(含抗虫基因) 导入 与运载体DNA拼接 棉花植株(有抗虫特性) 关键步骤一:抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取 关键步骤二:抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三:抗虫基因进入棉细胞 关键步骤一的工具:基因的剪刀——限制性内切酶 关键
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