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《发酵工程》期末复习题 第一章 绪论 1、掌握发酵史的六个阶段和四个转折点 六个阶段 1、天然（自然）发酵阶段 2、纯培养技术的建立 3、通气搅拌发酵技术的建立 4、人工诱变育种与代谢控制发酵工程技术的建立 5、开拓新型发酵原料时期 6、与基因操作技术相结合的现代发酵工程技术阶段 四个转折点 纯培养:第一个转折点 通气搅拌发酵:第二个转折点 代谢控制：第三个转折点 化学合成+微生物发酵：第四个转折点 2、发酵工业有何特点？发酵工业的范围包括哪些？ 发酵工业的特点 1)?原料广：淀粉质、糖蜜或其他农副产品，废水和废物等 2)?微生物主体：筛选、诱变或基因工程手段获得高产优良的菌株；避免杂菌污染 3)?反应条件温和，易控制 4)??产物单一，纯度高 5)?投资少，效益好 发酵工业的范围 1）以微生物代谢产物为产品的发酵工业 2）以微生物酶为产品的发酵工业 3）以微生物细胞为产物的发酵工业 4）生物转化或修饰化合物的发酵工业 5）微生物废水处理和其他 3、掌握发酵工业生产流程的6个环节 1、菌种的选育 2.培养基的制备 3.灭菌 4.扩大培养 5、发酵过程（中心阶段） 6、产品的分离提纯 第二章 菌种及扩大培养 名词解释： 菌种选育：种子扩大培养：是指把保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入固体试管斜面活化后，再经过摇瓶或静置培养，以及种子罐逐级扩大培养而获得一定的数量和质量的纯种制备过程。 种子罐级数：指制备种子需逐级扩大培养的次数。 接种龄：种子罐中培养的菌体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。 接种量：是指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。 菌种退化：是指在较长时期传代保藏后，菌株的一个或多个生理性状和形态特征逐渐减退或消失的现象。 简述发酵工业对微生物菌种的要求 1、能在廉价原料制备的培养基上迅速生长和生成所需的代谢产物产量高。 2、培养条件易于控制 3、生长迅速，发酵周期短 4、满足代谢控制的要求 5、抗杂菌和噬菌体能力强 6、遗传性状稳定，菌种不易变异退化 7、在发酵过程中产生的泡沫要少 8、对需要添加的前体物质有耐受能力，并且不能作为一般碳源利用 9、安全性（不是病源菌，不产毒素） 工业生产常用的微生物菌种有哪几类？ 细菌：枯草杆菌，短杆菌，大肠杆菌 酵母：酿酒酵母（啤酒，葡萄酒），酒精酵母，假丝酵母 霉菌：黑曲霉，米曲霉，红曲霉，根霉，木霉，青霉 放线菌：单孢菌 其他：担子菌、藻类、病毒、…… 分离筛选菌种可分为哪四步？ 样品采集→增殖培养→纯种分离→生产性能测定 菌种选育的常用方法有哪些？哪些以基因突变为理论基础？哪些以基因重组为理论基础？ 施加选择性压力分离法 随机分离方法 菌种退化的现象有哪些？引起退化的原因是什么？防止退化的方法有哪些？ 细胞形态和菌落特征的改变 产孢子数量的降低 生长速度缓慢 代谢产物的减少 原料转化率下降 对不良环境抵抗能力的下降等 引起菌种退化的原因 1）基因突变2）变异菌株性状分离3）连续传代4）其他因素 防止菌种退化的方法 （1）控制传代次数（2）选择合适的培养条件（3）利用不同类型的细胞进行传代（4）选择合适的保藏方法 退化菌种复壮方法有哪些？ 1、菌种的纯化2、通过寄主体进行复壮3、淘汰已衰退的个体 菌种保藏的基本原理是什么？工业微生物菌种保藏目的是什么？ 根据菌种的生理、生化特点，人工地创造条件，使菌种的代谢活动处于不活泼、生长繁殖受到抑制的休眠状态。 工业微生物菌种保藏目的：提高菌种存活率、减少菌种的变异、使菌种生产能力和与生产工艺相适应的优良性状保持稳定。 比较各种保藏方法的原理和适用范围。 1、斜面低温保藏法 原理：低温 适用菌种：各类微生物。 2、石蜡油封保藏法 （矿油封藏法） 原理：缺氧。 适用菌种：适用于保存部分霉菌、酵母、放线菌，对细菌效果较差。 3、干燥保藏法 原理：干燥。 沙土管法 适用菌种：产芽孢或孢子的微生物。 滤纸保藏法 大(小)米保藏法 4、真空冷冻干燥法（冻干法） 原理：低温、干燥、缺氧 适用菌种：各类微生物（除了丝状真菌的菌丝体外） 5、液氮超低温保藏法 原理：低温（液氮的温度可达-196℃，远远低于微生物新陈代谢作用停止的温度 -130℃）。 适用菌种：大多数微生物 种子扩大培养的任务和目的 种子扩大培养的任务：为每只发酵罐的投料提供相当数量的代谢旺盛的种子。不但要得到纯而壮的培养菌，而且还要获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。 种子扩大培养的目的：（1）接种量的需要；（2）菌种驯化；（3）缩短发酵周期，提高发酵设备利用率，节省动力消耗。 种子制备过程包括哪两个阶段？ 实验室种子制备阶段和生产车间种子制备阶段