食源性致病菌的快速检测幻灯片.pptVIP

食源性致病菌的快速检验 孙颖 Marketing Specialist Microbiology Division Thermo Fisher Scientific 食源性致病微生物检验 大肠菌群检验：Brilliance大肠菌群/大肠杆菌显色培养基 阪崎肠杆菌检验：Brilliance阪崎肠杆菌显色培养基 金葡菌检验：Dryspot金葡菌乳胶凝集试剂盒 生化鉴定：RapID鉴定板条 大肠菌群(coliforms)的检验 大肠菌群：在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。 该菌群主要来源人的粪便，作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能性。 传统检验方法：1、MPN法；2、平板计数法；时间至少需要2-4天 《GB/T4789.3-2010 食品卫生微生物学检验 大肠菌群计数》 第一法：MPN法 《GB/T4789.3-2010 食品卫生微生物学检验 大肠菌群计数》 第二法：平板计数法 Brilliance大肠杆菌/大肠菌群显色琼脂 原理：培养基中含有两种显色底物Rose-Gal(检测β-半乳糖苷酶)和X-Glu(β-葡萄糖醛酸酶活性) 使用方法：采取涂布法、倾注法或滤膜法均可；37°C 培养24h 制成培养基：BO8004M(100ml/瓶); BO8004T(250ml/瓶); BO8004V(500ml/瓶); 大肠杆菌/大肠菌群显色琼脂干粉：CM1046B（500g） 阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)的检验 革兰氏阴性杆菌，可引新生儿脑膜炎、败血症及致死性小肠结肠炎 高度耐受干燥，为其在奶粉生产的干燥环境中存活提供了非常有利的条件 婴幼儿配方奶粉是婴儿感染阪崎肠杆菌的主要途径 《GB/T4789.40-2010食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验 》 阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)显色培养基 曾写入GB2008版阪崎肠杆菌检测方法 原理：与其他肠杆菌不同，阪崎肠杆菌独有α-葡萄糖苷酸酶。显色琼脂中含有该种酶的底物。 菌落颜色： 干粉：CM1055B 制成培养基：BO8002M(100ml/瓶); BO8002T(250ml/瓶); BO8002V(500ml/瓶); 金葡菌的鉴定 传统方法 血浆凝固酶试验：取新鲜配置兔血浆0.5 mL，放入小试管中，再加入BHI 培养物0.2 mL～0.3 mL，振荡摇匀，置36℃±1 ℃温箱或水浴箱内，每半小时观察一次，观察6 h，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。 Dryspot 加强型金黄色葡萄球菌试剂盒 检测的乳胶试剂完全固定在检测卡上 减少手工操作 减少操作错误 降低污染的可能 室温储存，质量更稳定，储存运输更安全 货号：DR0100M 规格：120测试 原理： 凝集因子←纤维蛋白原 蛋白质A ←IgG 荚膜多糖←IgG 干式乳胶凝集试剂 Reagent Formulation 操作 程序： 结果观察： 阳性结果：20秒之内发生凝集 阴性结果：20秒之后在检测圈内未发生凝集反应且蓝色悬浮液保持光滑 注意事项： 2 ℃至25 ℃之间保存，确保干燥，防止卡片上形成冷凝水 生化鉴定——Remel RapID ?手工鉴定系统 原理：生化鉴定；酶学技术；基于特定底物的微生物降解可被多种指示剂系统检测到 特点： 简单的一步接种 4小时孵育，无需厌氧培养 无需覆盖矿物油 检测构成酶，无需微生物的生长， 结果清晰-颜色鲜艳清晰，与比色卡对比更易判读 大容量、及时更新的数据库 RapID ?手工鉴定系统 RapID ONE –用于氧化酶阴性、革兰氏染色阴性杆菌 （如肠杆菌科细菌）的鉴定 RapID ANA II – 用于厌氧菌鉴定 RapID NF Plus – 用于不发酵葡萄糖的革兰氏菌阴性菌以及其他选择性发酵葡萄糖的氧化酶阳性的革兰氏阴性菌的鉴定 RapID NH – 用于奈瑟氏菌、嗜血杆菌和包括卡他莫拉菌在内的其他菌的鉴定 RapID CB Plus – 用于棒状杆菌和其他不规则的革兰氏阳性菌的鉴定 RapID ?手工鉴定系统 RapID Yeast Plus – 用于酵母菌和类酵母菌的鉴定 RapID STR – 用于链球菌和其他相关微生物（如肠球菌、明串珠菌和单增李斯特菌等）的鉴定 RapID SS/u – 用于尿路致病菌（革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和一定的酵母）的鉴定 RapID STAPH PLUS-用于葡萄球菌和其他过氧化氢酶阳性、革兰氏阳