外源化合物致突变作用.ppt

第七章外源化学物致突变作用 目的要求 掌握外源化合物的致突变作用 熟悉致突变作用的评价方法 了解致突变作用的遗传学基础 第一节 概述 孟德尔用豌豆作杂交试验发现了孟德尔定律，并解释说性状是由“遗传因子”负责传递的。 1909年，丹麦遗传学家约翰逊创造了“基因”这个词，用来表述孟德尔所说的遗传因子，没有提出基因的物质概念。 摩尔根对果蝇的研究发现了新的遗传的连锁交换定律，将特定基因与某一条特定染色体上的特定位置联系起来，赋予了基因以物质的内涵。 等位基因 一对同源染色体统一基因座上的一对基因称为一对等位基因（allele）。 二倍体细胞每一个基因是成对存在的，每一对基因分别来自双亲的染色体的同一位置上，这个位置称为基因座（locus）。 等位基因之间有相互作用：如完全显性，不完全显性等。 非等位基因之间也存在相互作用。 复等位基因 在某一种生物的群体中，每一个基因座上可以有两个以上的等位基因，这就是复等位基因（multiple allele）。 例如人类的血型就是由IA,IB,i 3个复等位基因决定的，这几个基因各自编码特定的红细胞表面抗原。 外显子和内含子 — 基因的结构是断裂的 原核生物的基因结构大多数是连续的，即基因编码蛋白质的序列是不中断的。而真核生物基因的编码序列是不连贯的，即在两个编码序列之间有一段不编码蛋白质的非编码序列。 编码序列称为外显子（exon），非编码序列称为内含子（intron）。 外显子是出现在mRNA分子中的基因序列；内含子则是不出现在mRNA分子中的基因序列。 遗传毒理学（genetic toxicology） 研究化学性和放射性物质的致突变作用以及人类接触致突变物可能引起的健康效应。 主要研究致突变作用机理 寻找敏感检测系统发现和探究致突变物 提出评价致突变物健康危害的方法 突变是致突变作用的后果 致突变物（mutagen）：能引起突变的物质，又称诱变剂 遗传毒物（genotoxic agent）：因致突变物能引起遗传物质损伤，又称其为遗传毒物 直接致突变物（direct-acting mutagen）:具有很高的化学活性，其原型就可引起生物体突变的物质 间接致突变物（indirect-acting mutagen）:本身不能引起突变，必须在体内经过代谢活化才具有致突变性的物质 第二节 化学毒物的致突变类型 遗传 基因突变 染色体结构改变 染色体数目改变 机理 以DNA为靶的损伤： 基因突变 染色体畸变 不以DNA为靶的损伤 染色体数目改变 碱基置换（base substitution） 突变的后果 同义突变（ synonymous mutation）:指没有改变基因产物氨基酸序列的改变 错义突变（ missense mutation）:指碱基序列的改变引起了产物氨基酸序列的改变 无义突变（nonsense mutation）:指某个碱基的改变使代表某个氨基酸的密码子变为蛋白质合成的终止密码子，导致多肽链在成熟之前终止合成的改变 染色体畸变类型 染色体畸变类型 第三节 化学毒物致突变作用的机制及后果 1.生殖细胞突变 致死性突变 非致死性突变 第四节 机体对致突变作用的影响 一、DNA损伤的修复 光复活 “适应性”反应 切除修复 呼救性修复（SOS） 复制后修复 第五节 观察化学毒物致突变作用的基本方法 观察项目的选择 基因突变试验： 鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验 ） 、哺乳动物细胞基因突变试验 染色体畸变试验： 染色体分析 、微核试验 DNA损伤试验 ： 姐妹染色单体交换(SCE)试验 、程序外DNA合成试验 Ames试验 检测受试物诱发鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型突变株(his-)回复突变成野生型(his+)的能力。 试验菌株都有组氨酸突变(his-)，不能自行合成组氨酸，在不含组氨酸的最低营养平皿上不能生长，回复突变成野生型后能自行合成组氨酸，可在最低营养平皿上生长成可见菌落。 计数最低营养平皿上的回变菌落数来判定受试物是否有致突变性 标准试验菌株有四种：TA97和TA98检测移码突变, TA100检测硷基置换突变,TA102对醛、过氧化物及DNA交联剂较敏感。 用 Ames法检测诱变剂 微核试验 经致突变物作用后，染色体无着丝点断片或因纺锤体受损伤而丢失的整个染色体在细胞分裂的后期仍留在子细胞的胞质内，成为一个或几个规则的次核，称为微核。 常用啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验。 PCE是红细胞成熟的一个阶段，此时红细胞的主核已排出，微核容易辩认. 微核实验进展 体外微核：CHL/C