真核基因在大肠杆菌中的表达3答题.pptVIP

大肠杆菌表达真核基因的劣势 转录信号的不同：真核基因转录的mRNA不具备结合细菌核糖体所必须的SD序列；细菌的RNA聚合酶不能识别真核启动子。 Lac启动子的表达载体 如何提高目的蛋白的可溶性表达 3.与分子伴侣或折叠酶共表达。 常用的分子伴侣有： GroES-GroEL DnaK-DnaJ-GrpE ClpB 常用的折叠酶有： peptidyl prolyl cis/trans isomerases (PPIs) disulfide oxidoreductase (DsbA) and disulfide isomerase (DsbC) protein disulfide isomerase (PDI) 4.分泌表达：使目的蛋白分泌到周质空间。 周质空间的氧化性的环境有利于二硫键的形成，而胞内则是还原性的。 周质空间有折叠酶DsbA和DsbC的存在，帮助蛋白正确折叠。 周质空间很少有蛋白酶存在，不会被水解。 可以使对细胞有毒性的蛋白大量存在。 5.使用特定的菌株。 AD494, which has a mutation in thioredoxin reductase (trxB). Origami，a double mutant in thioredoxin reductase (trxB) and