不同植物中柯里拉京含量的高.docVIP

doi: 10.6043/j.issn.0438-0479.201603105 不同植物中柯里拉京含量测定及其抑制胃癌活性研究 林志灿1,2，林靖怡2，林河通1，明艳林1,2* (1福建农林大学食品科学学院，福建 福州350002；2 厦门华侨亚热带植物引种园厦门市植物引种检疫与植物源产物重点实验室，福建 厦门 361002) 摘要建立HPLC)测定柯里拉京含量的方法，比较不同植物的柯里拉京含量，筛选出柯里拉京含量高的植物并初步研究其抑制胃癌的活性 HPLC结果显示：龙眼核、叶下珠、龙眼壳、榄仁树和纤梗叶下珠的柯里拉京含量较高，依次为643619, 569, 271和159 μg/gMTT)法测得柯里拉京对胃癌细胞SGC7901的IC50)值为42.46±3.31) μmol/L；AO/EB)和Hoechst 33258染色结果表明柯里拉京能诱导胃癌细胞SGC7901凋亡摸索的HPLC条件能较快速、准确地检测出不同植物的柯里拉京含量所测的12种材料中龙眼核的柯里拉京含量最高；柯里拉京抑制胃癌的活性 关键词: 柯里拉京；HPLC；含量测定；抑制胃癌增殖 中图分类号: R 282.71 文献标识码: A 柯里拉京(Corilagin, (-1-O-galloyl-3,6-(R)-hexahydroxydiphenoyl-D-glucose)，又名鞣云实精，属可水解鞣质，分子量63445，柯里拉京在叶下珠Phyllanthus urinaria L.)[1]、龙眼Dimocarpus longan Lour.)[2]、余甘子Phyllanthus emblica Linn.)和榄李Lumnitzera racemosa Willd.)等多种植物中有分布，且是老鹳草、叶下珠等中草药及制剂的指标成分但关于柯里拉京单体的研究近几年才逐渐深入 研究发现柯里拉京具有抗氧化、抗炎、保护肝脏等活性特别是有良好的抗肿瘤[]活性在体外可显著抑制人肝癌[]、卵巢癌、癌[]、胆管癌[6]等多种癌细胞株的生长，在体内也可以明显抑制卵巢癌和肝癌移植瘤的生长，且对正常细胞毒性非常低[]. 目前柯里拉京的主要来源还是植物提取柯里拉京的需求量越来越大但关于柯里拉京在植物中的分布、含量等的研究报道很少[8].本10种植物12建立HPLC）测定方法对进行柯里拉京的含量测定比较筛选出柯里拉京含量高的植物并在体外实验中测对胃癌细胞SGC7901的效果 1 材料与方法 1.1 材 料 6科8属的10种植物12个部位为供试植物样品：叶下珠(Phyllanthus urinaria L.)全草、纤梗叶下珠(P. tenellus Roxb.)全草、锐尖叶下珠(P. debilis Klein ex Willd.)全草、铁苋菜(Acalypha australis L.)全草、火炭母(Polygonum chinense L.) 带叶嫩枝、三白草(Saururus chinensis (Lour.) Bail.)、榄仁树(Terminalia catappa L.)叶、龙眼(Dimocarpus longan Lour.)壳、龙眼核、荔枝（Litchi chinensis Sonn.）壳、荔枝核、石榴（Punica granatum L.）籽.12种材料均由厦门华侨亚热带植物引种园专家鉴定；对照品柯里拉京购自成都瑞芬思生物科技有限公司(批号：K-004-150730)，纯度98%；色谱纯乙腈、甲醇、吖啶橙（AO）购自Sigma公司；溴化乙锭（EB）购自生工生物工程（上海）股份有限公司；Hoechst 33258购自碧云天生物技术研究所；新生胎牛血清（FBS）购自美国Hyclone公司；细胞培养基RPMI1640购自美国Gibco公司；其他试剂均为国产分析纯试剂；人胃癌细胞SGC7901购自中国科学院上海细胞所 1.2 方 法 1.2.1 高效液相色谱(HPLC)条件 色谱柱Waters XBridgeTM Shield RP18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；DAD检测器，检测波长280 nm；柱温30；流动相流速1 mL/min；进样量20 μL；流动相乙腈(A)-01%磷酸水溶液(B)洗脱程序V(A):V(B) =15:85；10~15 min，V(A):V(B) =20:80；15~20 min，V(A):V(B) =25:75. 1.2.2 标准曲线的制备 精密称取柯里拉京对照品25 mg，50%甲醇定容至10 mL得0.25 mg/mL的标准溶液将分别稀释成浓度为0025, 0.050, 0.075, 0.100, 0.125 mg/mL，进样 μL，记录峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线 1.2.3 植物样品 精密称取烘