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倒荧光显微镜
倒置荧光显微镜——德国LEICA DMI3000B
1.徕卡DMI3000B倒置荧光显微镜各部件及名称如下:
仪器用途和参数
用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的荧光观察
具有明场, 暗场, 荧光和霍夫曼的功能
物镜:5X;10X;20X;40X
标准荧光滤色块(紫外EX: BP 340-380,EM: LP 425、蓝(窄带)EX: BP480/40,EM: BP 527/30、绿色激发滤色块EX: BP 515-560,EM: LP 590)
重要事项
物镜调焦应遵循“低至高”的原则。由于倒置显微镜物镜镜头朝上,容易积累灰尘。应先用吹气球吹掉镜头表面浮尘,再用棉签沾少许清洁剂(混合液:无水酒精30%+无水乙醚70%),清洁物镜表面的油垢。
透射光路灯光亮度应遵循“低至高”的原则。关闭显微镜前,将灯泡亮度调至最低,将有利于更好的延长灯泡寿命。
应遵循先显微镜后软件的启动顺序,关闭则先关闭软件,再显微镜。
为确保显微镜目镜观察与摄像器显示的图像“齐焦”,预先对观察目镜做“齐焦修正”。即:先调节显微镜的焦距旋钮,确保摄像器所拍摄的样品图像清晰。然后,旋转调节目镜的焦距,直至观察图像也清晰。
卤素灯关闭前应将亮度调至最暗,再关闭开关。
荧光光源开关原则:每次开30min后,才可关闭;下次开启,间隔30Min才可开启
使用完毕显微镜,勿盖防尘罩,待汞灯冷却后,再盖
使用条例
前三次使用,由老师带教
禁止私自开机;不熟悉的功能禁止私自调节;禁止搬动显微镜任何部件;禁止对显微镜进行拆装;使用过程中有私自进行的非正常操作,造成仪器损坏的,照价赔偿
数据保存:D盘:实验人员文件夹;数据刻盘,禁止使用U盘拷数据
如有问题,联系老师
操作规程
启动显微镜电源。开启顺序:显微镜—电脑—软件
明场Bright Field (TL)观察法
将聚光器设为明场(BF)
从光路上移除其他的光学元件(如偏光镜,检偏镜,或者IC棱镜)
放入一个非荧光的样本
选择物镜
在左下角手动调节亮度
聚焦观察
如需观察非霍夫曼结构的的样本,将物镜下左手黑色宽拉杆拉至O位置。
荧光观察法
开启顺序:EL6000激光器—显微镜—电脑—软件
EL6000激光器打开顺序:打开开关 — 按下shutter键 (开) — Intensity 调节最大
先在明场下找到视野,然后拉出荧光挡板拉杆,使荧光开启。
选择适合的荧光滤块(旋转滤块转盘,依次对应切换)
观察红光,选择1:A
观察蓝光,选择2:GFP
观察绿光,选择3:N2.1
选择适合的荧光滤块(旋转滤块转盘,依次对应切换)
选择合适的物镜(5x, 10x, 20x, 40x)
使聚光镜转盘-物镜-和左手黑色拉杆相对应。非常重要!
图象处理软件
结束观察后,按下列顺序关闭系统: 关闭图像应用软件;降低样品台,移出样品;清洁油物镜和样品;转入低倍率的物镜(例如:5x)
结束观察后,按下列顺序关闭系统: 关闭图像应用软件;降低样品台,移出样品;清洁油物镜和样品;转入低倍率的物镜(例如:5x)。
关闭显微镜电源,关闭EL6000(至少使用半小时后才可关闭)
EL6000激光器关闭顺序: Intensity 调节最小 — 弹出shutter键 (关) — 关闭开关(至少使用半小时后才可关闭)
电源开关
灯泡状态
右侧图:
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