中国药科大学药物分析教研室鉴别试验.ppt

Free template from 第八章 杂环类药物的分析Analytical of Heterocyclic drugs 本章简介 第一节 吡啶类药物 结构与化学性质 含有N原子的六元单环，例如：异烟肼、尼克刹米和硝苯地平 主要化学性质与鉴别反应 弱碱性：吡啶环N原子为碱性原子，吡啶环pKb为8.8（水中） 尼克刹米：除了吡啶环上的N原子外，吡啶环β位被酰氨基取代，遇碱水解释放二乙胺。 Chp2005鉴别：取本品10滴，加氢氧化钠试液3ml ，加热，即发生二乙胺的臭气， 能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色。 主要化学性质与鉴别反应 还原性：异烟肼吡啶环γ位被酰肼所取代，有较强的还原性，可被不同的氧化剂氧化，也可与某些含有羰基的化合物发生缩合反应。 缩合反应 Chp2005异烟肼鉴别：取本品约0.1g，加水5ml 溶解后，加10％香草醛的乙醇溶液 1ml， 摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶；滤过，用稀乙醇重结晶，在105 ℃干燥后，依法 测定（附录Ⅵ C），熔点为228 ～231 ℃，熔融时同时分解。 异烟肼的其他鉴别反应 与亚硒酸作用，可将其还原为红色硒的沉淀 主要化学性质与鉴别反应 吡啶环的特性： 吡啶环开环 \ 戊烯二醛反应（k?ning反应） 适用于α、α’位无取代的异烟肼、尼克刹米 主要化学性质与鉴别反应 吡啶环的特性： 二硝基氯苯反应（Vongerichten反应）：在无水的条件下，吡啶及其衍生物与3,4-二硝基氯苯混合共热或加热至熔融，冷却后，加醇制氢氧化钾溶液将残渣溶解，溶液呈紫红色。 异烟肼－氧化成羧基；尼克刹米－水解成羧基 吡啶环的鉴别反应 形成沉淀的反应 可与重金属盐类或苦味酸形成沉淀 尼克刹米的鉴别：取本品2滴，加水1ml ，摇匀，加硫酸铜试液2滴与硫氰酸铵试液3 滴，即生 成草绿色沉淀。 异烟肼、尼克刹米可与氯化汞形成白色沉淀。 分解产物的鉴别反应 异烟肼、尼克刹米等与无水碳酸钠或氢氧化钙共热，可发生脱羧降解，并有吡啶臭味逸出。 紫外吸收光谱鉴别 有关物质检查 一、异烟肼中肼的检查 异烟肼不稳定，游离肼即可能在原料中引入，又可能在贮藏过程中降解－诱变剂和致癌物质 1、TLC 检查方法：取本品，加水制成每1ml 中含50mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼 加水制成每1ml 中含0.20mg（相当于游离肼50μg ）的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取供试品溶液10μl 与对照溶液2μl，分别点于同一硅胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）上，以异丙醇－丙醇(3:2) 为展开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15分钟后检视。在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。 －－限度：0.02%。 有关物质检查 2、比浊法 JP(14)采用样品中加水杨酸的乙醇溶液观察浑浊的方法－专属性差 3、差示分光光度法 原理： 肼－对-二甲氨基苯甲醛→黄色缩合物（对-二甲氨基苯甲醛连氮）465nm波长有最大吸收 异烟肼－对-二甲氨基苯甲醛→缩合物（对-二甲氨基苄叉） 465nm波长无吸收 加入3%丙酮，可使得黄色缩合物（对-二甲氨基苯甲醛连氮）变为无色的二甲基甲酮连氮，继而作为参比，用于测定△A456nm，并以对照品比较法计算游离肼的含量。 －－专属、准确、灵敏，最低检测限可达0.1μg/ml。 有关物质检查 二、尼克刹米中有关物质的检查 TLC 无杂质对照品－高低浓度对比法 检查方法：取本品，加甲醇制成每1ml 中含40mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇分别稀释成每1ml 中含0.4mg 和40μg的溶液，作为对照溶液(1)和(2) 。照薄层色谱法（附录Ⅴ B）试验，吸取上述三种溶液各10μl ，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿－丙醇(75:25)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液(2)的主斑点比较，不得更深 ；如有1点超过时，应不深于对照溶液(1)的主斑点。 有关物质检查 遇光不稳定－光化学歧化作用 HPLC法检查硝苯地平中的有关物质检查 避光操作 取本品，精密称定，加甲醇分别制成每1ml中含1mg和0.2mg的溶液，作为供试品溶液Ⅰ和Ⅱ。 取硝苯地平有关杂质对照品A和B各10mg， 精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液Ⅰ。分别精密量取供试 品溶液Ⅱ和对照品溶液Ⅰ各1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为对照品溶液Ⅱ。 照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(3:2)为流动相；检测