基因重组技术.ppt.ppt

重组DNA技术 （二）工具酶 限制性核酸内切酶 DNA聚合酶Ⅰ 逆转录酶 T4DNA连接酶 碱性磷酸酶 末端转移酶 Taq DNA聚合酶 DNA连接酶 （三）目的基因 cDNA (complementary DNA) 基因组DNA (genomic DNA) 作为基因工程运载体的条件 （一）目的基因的获取 1. 化学合成法 要求：已知目的基因的核苷酸序列或其产物的氨基酸序列 。 2.基因组DNA文库(genomic DNA library) 3. cDNA文库(cDNA library) 4. 聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR) 五、重组体在宿主细胞中的表达和调控 基因工程的最终目的是通过载体将外源基因导入合适的宿主细胞中高效表达，产生有重要价值的蛋白质产品。 克隆基因表达条件：⑴ 基因的编码区不能被插入序列中断;⑵ 基因转录要有启动子，而启动子必须能被宿主 细胞的RNA聚合酶有效地识别;⑶ mRNA必须相当稳定，并有效地被翻译，产生的外 源蛋白质必须不为宿主细胞的蛋白酶所降解。 三、 重组技术在医学中的应用 产品名称 治疗功能与医药范围 1. 人胰岛素