第十二章核酸的生物合成.ppt

第十二章核酸的生物合成 ◆第一节 DNA复制 的一般规律 ◆第二节 与DNA复制有关的酶和蛋白质因子 ◆第三节 原核生物DNA复制的分子机制 ◆第四节 真核生物DNA的复制 ◆第五节 反转录（RNA指导的DNA聚合） ◆第六节 DNA的修复 ◆第七节 转录与“加工” ◆第八节 重组DNA技术 第十二章 核酸的生物合成 一、DNA复制是半保留的 由Watson和Crick的DNA双链结构所设想的三种DNA复制模型图 二、证明DNA复制是半保留的方式的Meselson和Stahl实验 三、DNA复制是单向或双向进行 E.coli染色体的双向复制 四、复制是半不连续的 DNA复制的半不连续模型图 第二节 与DNA复制有关的酶和蛋白质因子 一、DNA聚合酶（DNA复制酶） 1、E.coli DNA聚合酶Ⅰ （1）DNA聚合酶Ⅰ催化的DNA链延伸反应(5，—3，的聚合活性） （2）、DNAⅠ聚合酶具有校正与编辑属性（E.coli ） （3）DNA聚合酶Ⅰ的3’-5’外切核酸酶活性从生长的DNA链3’端切除错配碱基 （5）、聚合过程需要模板（DNA） （6）、聚合过程需要引物（RNA） 2、大肠杆菌的三种DNA聚合酶 （1）、DNA聚合酶Ⅰ （2）、 DNA聚合酶Ⅱ （3）、 DNA聚合酶Ⅲ 3、大肠杆菌DNA聚合酶的比较 项 目 Ⅰ　　　　Ⅱ　　　Ⅲ 结构基因 polA polB polC 亚 基 数 1 ≥4　　≥10 分 子 量 103000 88000 830000 3-5外切 有 有 有 活性 5-3外切 有 无 无 活性 多聚化速度 16-20 40 250-1000 （核甘酸/秒） 连续性（解离 前补加核甘酸 3-200 1500 ≥500000 数） 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的亚基 亚基 全酶中的亚基数 分子量 α 2 13200 ε 2 27000 θ　　　　 2 10000 τ　　　　　2 71000 γ　　　　　2 52000 δ　　　　　1 35000 δ 1 33000 χ 1 15000 ψ 1 12000 β 4 37000 基因 亚基的功能 polC(dnaE) 多聚化活性 dnaQ(mutD) 3-5外切酶 核心聚合酶 holE 活性(校正) dnaX 稳定模板结合 核心酶二聚化 dnaX* holA holB “钳”安置复合物 holC holD dnaN 增加复制连续性DNA的“钳” 4、DNA连接酶的作用机理 5.E.coli DNA复制中所涉及的蛋白质 蛋白质 亚基数目 功能 Dna A 1