第四章基因表达.ppt.ppt

基因表达(gene expression) 基因经过转录、翻译，产生具有特异生物学功能的蛋白质分子或RNA分子的过程。 产物： 产生具有特异生物学功能的蛋白质分子 转录合成rRNA、tRNA （三）原核生物核糖体结构 （四）原核生物的肽链合成过程 mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核糖体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 2.肽链的延长 根据mRNA密码序列的指导，次序添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。 多聚核蛋白体(polysome) ? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 二、真核生物的肽链合成过程 -与原核比较异同 主要包括 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 （一）多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成，新生肽链N端在核蛋白体上一出现，肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、模序、结构域到形成完整空间构象。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础。 细胞中大多数天然蛋白质折叠都不是自动完成，而需要其他酶、蛋白辅助。 （二）一级结构的修饰 1.肽链N端的修饰 2.个别氨基酸的修饰 3.多肽链的水解修饰 （三）高级结构的修饰 1.亚基聚合 2.辅基连接 3.疏水脂链的共价连接 （四）蛋白质合成后的靶向输送 蛋白质合成后需要经过复杂机制，定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位，这一过程称为蛋白质的靶向输送(protein targeting) 。 目 录 细胞核蛋白的靶向输送 IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi 肽链合成起始-70S起始复合物的形成 肽链延长在核蛋白体上连续性循环式进行，又称为核糖体循环(ribosomal cycle)，每次循环增加一个氨基酸，包括以下三步： 进位(entrance) 成肽(peptide bond formation) 转位(translocation) Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts GTP 1.进位（entrance）/ 注册（registration） fMet A U G 5 3 2.转肽/成肽(peptide bond formation) GTP 转肽酶 A U G 5 3 fMet GTP 3.移位/转位(translocation) A U G 5 3 Tu GTP 成肽 转位 进位 fMet AA GDP GTP 蛋白质合成是耗能（GTP）过程 核糖体循环 3.肽链合成的终止 当mRNA上终止密码出现后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核糖体等分离，该过程称为肽链合成终止。 终止相关的蛋白因子称为释放因子 (release factor, RF) 。原核生物释放因子：RF-1，RF-2，RF-3 。 1.识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。 2.诱导转肽酶改变为酯酶活性，使肽链从核蛋白体上释放。 RF的功能 U A G 5 3 RF COO- ——使蛋白质合成高速、高效进行。 第二节 真核生物的基因表达 一、转录-RNA合成 种类 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 转录产物 45S-rRNA hnRNA 5S-rRNA tRNA snRNA 对鹅膏蕈碱 的反应 耐受 极敏感 中度敏感 真核生物有三种RNA聚合酶，分别催化不同类型的RNA合成 （一）真核生物的转录过程 1.转录起始 真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。 转录起始点 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件(cis-acting element) 转录起始前的上游区段 AATAAA 切离加尾 转录终止点 修饰点 外显子 翻译起始点 内含子 OCT-1 OCT-1：ATTTGCAT八聚体 POL-Ⅱ TFⅡF ⅡA ⅡB POL-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE CTD