氮、磷、铁等营养盐与不动扁藻生长速率关系的试验周亚吉，吴良指导.docVIP

氮、磷、铁等营养盐与不动扁藻生长速率关系的试验 周亚吉，吴良 指导教师：王永强 摘 要: 在实验室模拟条件下, 研究了氮盐、磷盐和铁盐对不动扁藻生长繁殖的影响。结果表明: 不动扁藻生长繁殖最佳的培养液配方是, 天然海水加入(NH4 ) 2 SO4–N 30 g/m3; NaH2 PO4 – P 5 g/ m3和FeSO4– Fe 0 .4 g/ m3. 关键词：不动扁藻，氮盐，磷盐，铁盐 Abstract: The effect of nitrogen salt, phosphate and Iron salt on the growth and reproduction of Platymonas subcordiformis was studied under the experimental conditions . It could be sieved the following prescripti on for culture solution: natural seawater ; (NH4 ) 2 SO4–N 30 g/m3; NaH2 PO4 – P 5 g/ m3; FeSO4–Fe 0 .4 g/ m3 Key words: platymonas sp ; nitrogen salt; phosphate ; Iron salt 亚心形扁藻( Platymonas subcordiformis)属是一种海洋微藻， 其个体较大， 体长为11～16，宽7～9，厚3.5～5[1]。 由于它不但含有丰富的蛋白质、脂肪等营养物质，而且易被鱼、虾、贝（如泥蚶）等海珍品幼体摄食，因而在国内外被广泛培养以用作海珍品育苗的开口饵料。吴长斌等研究了氮源对雨生红球藻和扁藻生长的影响[2]。实验用的不动扁藻，不具有鞭毛，不运动，附着生活，其外部形态、内部构造均与亚心形扁藻相似，故名“不动扁藻”。该藻可作为鲍鱼的优良饵料。由于该扁藻为海南热带海区的新分离品种，开发其经济价值具有重要意义，故笔者研究了氮盐、 磷盐、铁盐及其浓度对不动扁藻生长繁殖的影响，从而筛选出最佳的营养盐配方，以期为今后的大规模培养提供数据。 1 材料和方法 1.1材料 试验用的不动扁藻由海南大学海洋学院水产系藻种室提供，该藻于2008年在文昌县翁田海区海水中取样分离出来的。试验前接种到1000ml三角烧瓶中进行活化纯培养，不充气，每天摇晃三到五次，取指数生长期的藻液进行试验。 1.2方法 1.2.1藻体培养条件 培养用的海水取自海口白沙门海区，经黑暗沉淀，再经脱脂棉过滤、煮沸、自然冷却后使用。海水pH8.2，密度1.020g/cm3。试验用培养瓶选用250ml同型号的三角瓶，经洗液洗涤、晾干，130℃恒温消毒2小时。除温度试验外，其余试验组温度控制在24~26℃，光照强度3000lx，光周期10L：14D，培养时间为5天。培养时每天摇晃2次培养瓶，并随机交换位置，以减少光照差异。 1.2.2实验设计 氮 (N)的单因子试验以NaNO3、(NH4 ) 2 SO4、 和 (NH2 ) 2 CO作为氮源, 设置 7个梯度 , 氮的质量浓度分别为 0、10、20、30、40、50、60 g/m3;磷 ( P)的单因子试验以 KH2 PO4 和 NaH2 PO4 作为磷源,设置 7个梯度 ,磷的质量浓度分别为 0、0.5、1、2、3、4、5、6 g/ m3;铁 ( Fe)的单因子试验以 FeSO4·7H2O、FeCl3作为铁源, 设置 7个梯度, 其质量浓度为 0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6g/ m3;以上各组试验均设有 2个平行组。 1.2.3藻细胞计数 用 722S可见分光光度计测定吸光度, 同时用 XB-K- 25血球计数板计数。计数用的藻液用少许福尔马林固定, 1 d内计数完成, 每瓶重复 2次, 取平均值, 确定吸光值与藻细胞密度的关系。测定藻液的吸光值, 根据吸光值与藻细胞密度的关系换算成藻细胞密度。 1.2.4 藻细胞的分裂频率 藻细胞分裂频率 (K)用下列公式计算: K = ( lnNt - lnN0 ) / T, 式中: N0 为起始藻细胞浓度 ( cells/ml) ; Nt为经过 T时间培养的藻细胞浓度 ( cells/ml) ; T为培养时间 ( d)。 2　 结果与分析 2.1　 生长曲线 选用“ 宁波大学 3号 ”培养液配方，培养扁藻, 接种浓度为54×104cells/ml, 在光照 2000 lx、 温度 25℃的条件下培养, 设置两个平行组, 每日定时计数,取平均值。结果见表1, 并用细胞浓度的对数和时间作图 1。 表1　扁藻