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第七章 发酵工艺控制 发酵工艺控制的基础： 了解产生菌生长、发育及代谢情况及动力学模拟 了解生物、物理、化学和工程的环境条件对发酵过程的影响 如何进行控制？ 测定各种参数 依据参数变化，并通过动力学关系获得发酵过程的各项最佳 参数 一、发酵过程检测控制的主要的参数1、物理参数 发酵过程检测控制的主要的参数2、化学参数 发酵过程检测控制的主要的参数3、生物参数 发酵过程检测控制的主要的参数4、间接状态参数 μ qP qS qo2 (OUR) CER(Co2释放速率) RQ(呼吸商: CER/ OUR) Yxs Yps Kla 等 第一节 温度的影响及控制 一、温度对发酵的影响： 二、影响发酵温度变化的因素：发酵热（KJ/m3 h） 三、最适发酵温度的选择 第二节 pH的影响及控制 二、影响发酵pH变化的因素： pH的变化决定于所用的生产菌： 培养基中营养物质的代谢引起pH的变化： 培养基pH在发酵过程中能被菌体代谢所改变。若阴离子氮源被利用后产生NH3 ，则pH上升；有机酸的积累，使pH下降。 一般来说，高碳源培养基倾向于向酸性pH转移，高氮源培养基倾向于向碱性pH转移，这都跟碳氮比直接有关。 生理酸性物质和生理碱性物质的消耗 三、最适pH的选择 根据不同菌种的生理特性，确定不同的最适pH 同一菌种根据不同阶段，生长期采用最适生长的pH， 在产物采用最适产物合成的pH。 四、pH的控制 采用合适的培养基配比 C：N合适 生理酸性物质和生理碱性物质比例合适 添加缓冲物质：碳酸钙和磷酸盐 在发酵过程中直接补加酸或碱 过去流加硫酸或氢氧化钠， 现采用补加氨水、尿素、硫酸铵 在发酵过程中调节补糖速度控制pH 几种具体情况的调节方法 pH的控制系统 第三节 菌体生长速度和菌体浓度的影响及控制 菌体浓度的增加速度（生长速度）与微生物的种类和自身的遗传特性有关 最适菌体浓度的确定 优化控制的目标：在最短的时间内产生最大量的产物。(dP/dtMAX) 以青霉素发酵为例 过高的比生长速率和过高的菌体浓度造成的不利影响： 1、 μ过高，S消耗过快，有限的营养基质只能用于生长，而不足于产物合成。 生长速度和菌体浓度的控制方法 确定基础培养基的适当配比，防止培养基过于丰富或过于稀薄。 通过调节中间补料的速度和量来控制。 第四节 营养基质的影响及控制一、碳源 种类：葡萄糖 优点： 吸收快，利用快，能迅速参加代谢合成菌体和产生能量 缺点： 有些品种产生分解产物 阻遏效应。 二）、碳源浓度的影响 三）、碳源浓度的控制 在发酵过程中，补加糖类控制碳源浓度 残糖量 pH值 Qc X 粘度 溶氧 尾气中O2和CO2的含量 发酵液的总体积 补糖量的控制：经验法： 根据经验，以最高产量的罐批的加糖率为指标，并依据 菌体浓度、一定时间内的糖比消耗速率和残糖等加以修正。 例： 青霉素发酵开始补糖在残糖降至1.5%, pH开始回升时补糖。补糖量以最高罐批经验量为参考。 每小时 前期0—40h 中期40—90h 后期90以后 加糖量 0.08%-0.15% 0.15% - 0.18% 0.15% -0.18% 补糖量的控制：动力学方法 依据μ、 qP 、 qC等动力学参数 之间的关系，计算加糖量 具体方法： 1、求X0 测定 X OTR OUR 2、求μ、 qp 在发酵过程中，测定每小时菌体干重X和产物P 计算每小时μ、qp μ=△X/ △t X qp =△P/ △t X 3、确定适宜的μ—μ0 4、确定适宜的qC qC0 =m+ μ0/Yxs + qPmax/Yps 补糖的控制 二、氮源的影响和控制一）氮源的种类影响 种类：氨水、铵盐和玉米浆 优点： 易被菌体利用，明显促进菌体生长 缺点： 对于有些品种高浓度的铵离子抑制产物合成 三）氮源浓度的影响控制 补氮的依据：残氮量、pH值、菌体量 补氮量的控制： 经验法： 依据使pH升高0.1而通入氨水的量来计算。 依据残氮量和工艺控制残氮量来计算。 例： 土霉素发酵50m3发酵罐使pH升高0.1通氨量为10升。使氨基氮上升0.004%-0.005%。 动力学方法； 通过qN、μ、 qP ，计算每小时的补氮量。 三、磷酸盐的影响和控制一）磷酸盐源的影响 磷酸盐能明显促进产生菌的生长。 （0.32-300mM） 对于次级代谢产物，高浓度的磷酸盐能抑制产物合成。 （10mM以下） 二）磷酸盐浓度的控制 一般在基础培养基中采用适宜浓度。 对于初级代谢产物，磷酸盐浓度采用足量。 对于次级代谢产物，磷酸盐浓度采用生长亚适量。 一般磷酸盐采用单消，防止发生沉淀反应使溶磷