爱玉乳汁中提取CSN.ppt

LMWC和trolox对过氧化氢的自由基清除活性，荧光衰变曲线，。LMWC、COS对过氧化氢自由基的清除能力值分别为。。。。所有的均有显著的清除活性，AE和CM优于EG和COS。所有的LMWC均表现出显著的抗自由基能力，尤其是抗过氧化氢自由基的能力。 * LMWC和trolox对过氧化氢的自由基清除活性，荧光衰变曲线，。LMWC、COS对过氧化氢自由基的清除能力值分别为。。。。所有的均有显著的清除活性，AE和CM优于EG和COS。所有的LMWC均表现出显著的抗自由基能力，尤其是抗过氧化氢自由基的能力。 * * Characterization of a Chitosanase from JellyFig (Ficus awkeotsang Makino) Latex and ItsApplication in the Production of Water-Soluble Low Molecular Weight Chitosans PLOS ONE 报告人：李燕伶 2016.10 研究背景 萜类 生物碱 几丁质酶 橡胶 强心甾 β-1,3-葡聚糖酶 橡胶蛋白 脱乙酰几丁质酶酶 β-N-乙酰葡糖苷酶 蛋白酶 研究背景 脱乙酰几丁质（HMWCs） 低分子量脱乙酰几丁质（LMWCs） 壳寡糖（COS） 研究背景 脱乙酰几丁质具有抗肿瘤和抗氧化活性，并且具有能够激发机体免疫反应，减少胆固醇的作用。但是高分子量活性作用受到限制，而低分子量壳聚糖和壳寡糖能够增加抗肿瘤活性和有效地治疗肾衰竭。 脱乙酰几丁质的抗氧化活性可广泛的应用于食品，比如说防止脂类氧化、肉类储存，低分子量脱乙酰几丁质（LMWC）用于螃蟹的保存，食用膜的制备。 研究背景 研究内容 从爱玉乳汁中分离纯化出脱乙酰几丁质酶。 检测脱乙酰几丁质酶的pI、最适pH、最适温度、Km、Vmax、底物特异性等基本特性。 检测脱乙酰几丁质酶降解底物的产物—水溶性低分子量壳聚糖的抗氧化性及其应用。 01 02 03 研究结果 纯化后的脱乙酰几丁质酶活性达到原来的7.6倍，最终产率为9.5%。 最大反应速度 0.69umol min-1 mg-1 最适pH 4.5 最适温度 55℃ 米氏常数Km 0.089mg mL-1 EG-LMWCs CM-LMWCs AE-LMWCs 讨论 1.在果实成熟期间酶活会发生改变，作者想如果在脱乙酰几丁质酶酶活最高的时候收集乳汁脱乙酰几丁质酶的产率会更高。 2.清除不同自由基的能力的不同可能是由于取代基团的电子云密度的差异和接近各种自由基的能力不同的组合效应。 结论 1.爱玉乳汁中分离纯化出的脱乙酰几丁质酶分子量为20.5kDa；pI3.5，最适pH为4.5，最适温度为45℃；米氏常数Km为0.089mg mL-1，Vmax为0.69umol min-1 mg-1。该脱乙酰几丁质酶对脱乙酰度为21%-94%的脱乙酰几丁质聚合物均有催化活性，其中对脱乙酰度为70%-84%的脱乙酰几丁质更有效。 2.该脱乙酰几丁质酶能够裂解几丁质、脱乙酰几丁质以及它们的衍生物。且具有几丁质酶和脱乙酰几丁质酶两种不同活性。 3.该酶可以被用来制备水溶性的低分子量脱乙酰几丁质。其对ABTS+,超氧化物自由基和过氧化氢自由基均有较好的清除能力，即有抗氧化能力。 来自爱玉乳汁的脱乙酰几丁质酶的特性及在产生水溶性低分子量壳聚糖方面的应用 * 当植物组织受到损害时，大约8.9%的被子植物能够从乳汁细胞的管状结构中流出乳汁。乳汁中包括大量的化学物质和酶，萜类、生物碱、橡胶、强心甾、橡胶蛋白。研究显示分泌乳汁是植物对昆虫，微生物以及伤口的一种防御机制。而植物乳汁主要引诱并固定昆虫。生物碱和强心甾对动物和昆虫有毒性，几丁质酶相关蛋白能够裂解病原菌。 * 脱乙酰几丁质具有抗肿瘤和抗氧化活性，并且能够激发机体免疫反应，减少胆固醇的作用。但是高分子量活性作用受到限制，而低分子量壳聚糖和壳寡糖能够增加抗肿瘤活性和有效地治疗肾衰竭。 * 脱乙酰几丁质具有抗肿瘤和抗氧化活性，并且能够激发机体免疫反应，减少胆固醇的作用。但是高分子量活性作用受到限制，而低分子量壳聚糖和壳寡糖能够增加抗肿瘤活性和有效地治疗肾衰竭。 * 爱玉是台湾地区所特有的木质藤蔓植物，生长在热带和亚热带地区，从它的果实中的水样的提取物是夏季饮品的主要原料——凝胶。作者从这种成熟果实中提取的乳汁包含有较高的内切糖苷酶、蛋白水解酶、几丁质降解活性。后期作者发现了乳汁中大量的酶活蛋白。 * 作者前期在爱玉果乳汁内检测到的（蛋白酶、几丁质酶、脱乙酰几丁质酶、过氧化氢酶、N乙酰葡