08-高效液相色谱法w幻灯片.pptVIP

* 8.4 高效液相色谱流动相 4. 选择流动相时应注意的几个问题 ? 尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。 ? 化学惰性好，不与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱。如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。 * 8.4 高效液相色谱流动相 ? 试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。 ? 低黏度。黏度太大会降低样品组分的扩散系数，造成传质减慢，柱效下降，同时引起柱压升高。 ? 流动相同时还应满足检测器的要求。如当使用紫外检测器时，流动相不应有紫外吸收。 * 8.5 影响分离的因素 1. 提高柱效的途径 在高效液相色谱中，液体的扩散系数仅为气体的万分之一，则速率方程中的分子扩散项B/u 较小，可以忽略不计，即： 液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同，如图所示： H = A + C u * ? 液体的粘度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍，故降低传质阻力是提高柱效主要途径。 ? 由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。 ? 液相色谱中，不可能通过增加柱温来改善传质。一般采用恒温。 ? 改变淋洗液组成、极性是改善分离的最直接的因素。 P282-284 8.5 影响分离的因素 * 8.5 影响分离的因素 2. 流速对分离的影响 但在实际操作中，流量仍是一个调整分离度和出峰时间的