Biochemistry B-10RNA的生物合成和加工幻灯片.pptVIP

采用足迹法确定启动子的位置和序列 试验方法： 使DNA与RNA聚合酶结合，再用核酸内切酶处理（1）； 未与RNA聚合酶结合的DNA，同相同的核酸内切酶处理（2）； 电泳，对比（1）和（2）电泳条带； （2）条带＞（1）条带 根据缺失条带所处的位置，确定与RNA聚合酶结合的DNA片段 足迹法试验证明 DNA模板对应于RNA的第1个核苷酸为+1； 注意，没有0； 其下游，即转录区记为正数； 其上游，记为负数。 酶对启动子的识别是转录的第一步 大肠杆菌启动子：在转录开始位置的上游10个和35个核苷酸位置有两段DNA的序列比较保守，分别称为－10序列（－10 sequence）和－35序列（－35 sequence）。 -35区的序列与起始点辨认有关，称为辨认位点 -10区的序列称为Pribnow盒(box) ，结合位点 酶与模板的辨认结合 启动区共有序列——保守序列或一致性序列 Pribnow框盒（Pribnow box） 从起点上游约-10处找到6bp的保守序列TATAAT，称为-10序列或Pribnow框（box），与真核细胞和古生菌中的TATA Box功能相似。 A.T较丰富，易于解链。 功能: (1)RNA pol (RNA 聚合酶)紧密结合; (2)形成开放启动复合体； (3)使RNA pol定向转录。 Promoter(启动序列或启动子)： RNA聚合酶含有两个结合NT