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分子生物学 杨孝朴 第七章 基因工程 基因工程兴起于20世纪70年代初。1972年Berg P和他的同事将λ噬菌体基因和大肠杆菌乳糖操纵子插入猴病毒SV40DNA中，首次构建出DNA的重组体。由于SV40能使动物致癌，出于安全的考虑，这项工作没有进行下去。第二年，Cohen S和Boyer H将细菌质粒通过体外重组后导入宿主大肠杆菌细胞内，得到基因的分子克隆，由此产生了基因工程。 基因工程是对携带遗传信息的分子进行设计和施工的分子工程，包括基因重组、克隆和表达。基因工程这个术语既可用来表示特定的基因施工项目，也可泛指它所涉及的技术体系，其核心是构建重组体DNA的技术，因此基因工程和重组体DNA技术有时也就成为同义词。 1 基因工程工具酶 1.1 DNA限制酶 Arber W等早在20世纪50年代就己发现大肠杆菌具有对付噬菌体和外来DNA的限制系统，至60年代后期始证明存在修饰酶和限制酶，前者修饰宿主自身的DNA，使之打上标记;后者用以切割无标记的外来DNA。1970年Smith H O和Wilcox K W从流感嗜血杆菌中分离出特异切割DNA的限制性核酸内切酶，简称为限制酶。 1973年Smith和Nathans提出修饰一限制酶的命名法：取分离菌属名的第一个字母，种名的前两个字母，如有株名也取一个字母，当一个分离菌中不只一种酶时，以罗马数字表示分离出来的先后次序。修饰性甲基