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归去来系列 CAT#:121002-10 常温运输保存 绿如兰核酸染料(可见光型) DNAgreen（Visible Light） 使用手册V1.0 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区学院南路12号北师大留学生创业园57号楼301室 QQ:944823743，449730601（销售），948393554（技术）， 电话： 010010销售）技术），order@ 产品及特点 本产品是国内首款可见光核酸染料，用于电泳时替代EB，在可见光下观察DNA或RNA的电泳。本产品具有下列特点： 无毒。对人体和环境没有任何毒害，有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。 实时染色。可以在电泳过程中实时观察DNA和RNA的泳动，不需要任何额外的仪器设备或光源。注：本产品在紫外条件下不发光。 由于避免了UV对DNA的伤害，胶回收片段的克隆效率比UV下回收的片段高2-10倍，非常适用于PCR或酶切回收。 稳定。对光、水和热的稳定性很好，可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。 灵敏。检测灵敏度跟EB相当，能满足常规核酸电泳实验要求。 使用方法多样。既可以电泳中染色，也可以电泳后染色；既可用于琼脂糖胶，还可用于PAGE。 跟各种常用的核酸电泳缓冲液（如超快核酸电泳液、TBE、TAE）兼容，但在超快核酸电泳液中背景最低。 规格及成分 成份 编号 数量 绿如兰核酸染料(可见光型) 121002 10 mL（棕色瓶） 6×A型DNAon 3690A 1 mL 使用手册 1份 运输及保存 常温运输和保存保存期限。 使用方法之一：电泳中染色（琼脂糖电泳时使用） 在100mL融化的琼脂糖凝胶加入100 uL本产品，充分混合均匀后倒胶，凝固后凝胶将呈淡紫色。本产品不能跟其他任何核酸染料同时使用（如EB和SYBR Green I），否则会相互干扰，不会出现任何条带。使用时请严格按照此比例加入染料，否则将出现糊带现象。 将凝固的琼脂糖凝胶放在5分钟超快核酸电泳液、TEB或TAE中。为节约染料，不推荐将染料加到电泳缓冲液中。 将DNA样品与6×A型DNAon按5:1的比例混合后上样，由于本染料比EB灵敏度稍低，所以DNA的上样量和DNA Marker的上样量最好比使用EB染料时多1倍。注意：不推荐使用常规的含溴酚蓝和二甲苯蓝的上样液，因为这些染料的颜色跟DNA和RNA的颜色都将呈蓝色，将严重干扰条带的观察和解读。本产品提供的6×A型DNAon只含相当于50bp大小的红色染料，不会干扰蓝色DNA和RNA条带的观察。 电泳，电泳参数同常规的电泳。跑在前面的是红色的电泳示踪染料（来于上样液），其泳动速度相当于50bp的DNA。 直接在光线明亮的位置直接观察电泳的进行，DNA和RNA将呈现蓝色条带。如果有观察X光片用的灯箱，可以将电泳中的电泳槽或电泳后的凝胶平放在铺有塑料布的灯箱发光面的上面观察效果更佳。典型电泳结果如下： 如果要回收DNA，则关闭电泳后直接切下所需条带，其余回收过程同常规方法。 使用方法之二：电泳后染色（PAGE胶染色必须使用电泳后染色法，琼脂糖电泳也可以选择本方法。不论是PAGE胶还是琼脂糖胶，本方法所需染料的用量比电泳中染色大2-10倍） 按照常规方法进行PAGE电泳或琼脂糖电泳。 用电泳液将本产品稀释100-500倍（100 mL水需要加0.2-1 mL 本产品） A: 这是由于样品中有大量RNA小片段污染（基因组DNA提取时没有RNase处理的话常常会有大量RNA污染），这些小片段裹走了凝胶中的染料，使其后面的凝胶区域没有染料，因此后面的大片段没法染色。建议电泳后再染色观察大片段。 Q: 本产品可否用于RNA染色？ A：可以，也呈蓝紫色条带。 Q：本产品是否可以加入上样液中进行染色？ A：不行，本产品只能直接加入琼脂糖凝胶中进行染色或PAGE电泳后再染色。 Q：为何电泳时间长的话前端的DNA和RNA条带很淡或根本看不见？ A：跟EB一样，电泳时本产品朝负极方向移动，当前端的DNA（最小片段）进入没有染料的区域时，已经跟DNA或RNA结合的染料分子会逐渐脱落，所以条带会变淡或看不见。解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色。 Q：本产品在哪种缓冲液中效果最好？ A：本产品跟各种电泳缓冲液兼容，但背景最浅的是中超快核酸电泳液。 技术资料 是否所有核酸染料都有毒性？ 核酸染料对动物和人的毒性由多方面决定。一是染料的膜通透性。EB被归类为强诱变剂是由于其分子量较小，容易进入细胞内。而EB二聚体Ethidium Homodimer（EthD）