222动物细胞融合与单克隆抗体选编.ppt

一、动物细胞融合 仙台病毒 2、动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程 二、单克隆抗体 单克隆抗体的概念 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 抗体: 化学性质单一、特异性强 思考 ★制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？ 实验目的:制备单克隆抗体. 实验原理：B淋巴细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。 实验材料：小白鼠 实验器材：培养皿、针筒等等。 实验过程：如下页 * Company LOGO 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性（诱导细胞融合） 紫外线 物理法 化学法 生物法 不同DNA的两个细胞 灭活病毒诱导细胞融合 融合后的细胞进行有丝分裂 1、动物细胞融合过程 灭活病毒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 形成杂种细胞 病毒颗粒 细胞核 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 3、植物、动物细胞融合的比较 抗体 1、抗原 动物体内 刺激 浆细胞 抗原 动物体内 刺激 浆细胞 抗体 抗原不纯 抗体不纯 筛选单一浆细胞 不能增殖产生大量抗体 2、特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏 二、单克隆抗体 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 杂种细胞 二、单克隆抗体 ？ ？ 诱导其融合的方法有哪些？ 抗原 浆细胞 3.制备过程： B BB B瘤 瘤瘤 瘤 细胞融合后培养液中有几种细胞？ 筛选杂种细胞 已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，获得杂种细胞。 3.单克隆抗体的应用： ①在基础理论研究中具有重要意义 ②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有 特异性高、灵敏度高等优越性。 ③生物导弹 二、单克隆抗体 ★假如你掌握了动物细胞融合技术，你想用它来解决什么问题？ ★ 根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验方案: